D-二聚体操作程序.doc

海安县中医院 临床检验实验室 文件编号： 版本号：第1版 第0次修订 Ｄ－二聚体测定操作程序 生效日期：2010-01-01 页码：第 页，共 1.目的：本操作书的制定的目的是进行Ｄ－二聚体测定提供正确的操作方法 2.原理： D-二聚体检测试剂盒应用于干式免疫散射色谱原理进行测定，将血浆加入，D-Dime分子由于包被D-Dime单克隆抗体的膜捕获，然后加入D-Dime单克隆抗体于胶体金的缀合物溶液，膜中的D-Dime与金标抗体发生结合反应，形成三明治结合体，过剩的金标抗体用洗涤液洗去，用NycoCard READER 特种蛋白金标检测仪检测膜上的红色强度，红色强度于D-Dime的浓度成正比。 3.试剂 3.1 规格：48人份 3.2试剂组成：TD 检测装置 R1胶体金结合物 R2洗涤溶液 C阳性控制物 3.3 储存和稳定性： 4℃储存，在有效期内使用。 3.4试剂的准备和稳定性： 3.4.1．试剂盒已配套包装，不能拆分，直接使用。 3.4.2．试剂使用前应人工开盖，使用结束后应将试剂盖盖紧，放于4℃冰箱保存。 4 .标本要求 4.1 标本种类：血浆 4.2 标本收集及处理方法：于橼酸钠抗凝管采集1.6ml 的血液，颠倒混匀后分离待检 4.3 标本容器的要求：0.109 M枸椽酸钠抗凝剂中 4.4 标本储存： 血浆20℃可保存8小时，收集后应尽可能快测试。放置过久可影响检验结果 5．操作步骤： 5．1 先在检测卡的反应孔下写上标记号，患者或质控品各操作步骤应连续进行，不可延迟。 5．2标本处理 枸橼酸钠抗凝的标本应在收集后1小时内离心；应在3000rpm/min的条件下离心10分钟。 5．3依如下次序将反应物逐一加入反应孔。（每一溶液加入需待前一溶液完全渗滤后进行） R2洗涤液 50μl 血浆 50μl R1偶联液 50μl R2洗涤液 50μl 海安县中医院 临床检验实验室 文件编号： 版本号：第1版 第0次修订 Ｄ－二聚体测定操作程序 生效日期：2010-01-01 页码：第 页，共 5．4检测结果须在洗涤液完全吸入检测卡之后2分钟内立即判读。 5．5 使用NycoCard读数仪（测量范围 0.1-20.1 mg/L）：按SELECT，开机，显示Calibrate,用测试管对准白色底板，按ENTER，显示Calibrate,D-Dimer TEST，用测试笔对准已完成操作过的反应孔，按ENTER，即显示结果，同时按QUIT、ENTER即关机。 6．报告结果： 6．1 标本检测结果NycoCard读数仪直接读取，数据经操作者初次审核，初次审核结果后打印报告单，经小组负责人再次审核后发出。 6．2 报告样式：测量值 mg/L 7．质控： 7．1 阳性质控物： 主要是纤维蛋白的降解产物与小牛血清白蛋白的缓冲液及稳定剂。 7．2 每天应做质控，质控值为2.5±1.1 mg/L. 7．3 操作： 同样本操作。 7．4 分析：质控结果应在质控品所附的允许范围内，不能超过质控范围，失控应在《失控分析记录本》上进行失控分析。 8. 参考值范围：≤0.3 mg/L 9. 异常结果处理 测定结果超过或低于参考范围时，应与病情或历史结果进行比较，若与病情、历史结果不相符，或初次检测异常者应进行复查。 9．性能参数： 9．1 检测范围：0.1-20mg/L。 10 临床意义：纤维蛋白降解产物D的水平升高，表明体内存在着频繁的纤维蛋白降解过程。因此，纤维蛋白降解产物D是深静脉血栓(DVT)，肺栓塞(PE)，弥漫性血管内凝血(DIC)的关键指标。 10．1静脉血栓、肺栓塞和动脉血栓塞的诊断。 10．2纤溶作用机制的早期检测---血栓前危险评价。 10．3血栓形成过程及溶栓治疗的监测。 10．4弥漫性血管内凝血(DIC)的诊断。 10．5原发性纤溶与继发性纤溶的鉴别诊断。 10．6妊娠与分娩复杂性评价。 10．7肿瘤辅助诊断。 海安县中医院 临床检验实验室 文件编号： 版本号：第1版 第0次修订 Ｄ－二聚体测定操作程序 生效日期：2010-01-01 页码：第 页，共 11 .注意事项： 试剂中含有0.1%叠氮钠作为防腐剂系毒性物质，操作时应加以小心。不同批号的产品不能混用。 12 .废物处理：患者标本及阳性质控品应当作传染源处理，高压灭菌后交后勤保障部处理；所有试剂消毒浸泡后交后勤保障部处理。 13 .生物安全级别：按Ⅱ级执行。 编写者： 审核者： 批准者： 日期： 日期： 日期：