第五章 纸色谱简介.pdf

教学重点：比移值及色谱操作条件的选择。 第五章 纸色谱简介 5.1 基本原理 纸色层－纸上萃取色谱，它和萃取一样，它也是根据不同物质在两相间的分配比不同而进行分 离的 （相当于逆流萃取）。 1.层析缸 滤纸 2. 3.原点 展开剂 4. 5.前沿 斑点 6.7. 5.2 比移值R 组份分离后,它们在滤纸上的位置用比移值R表示。 f f 原点至斑点中心距离 x [定义]: R ＝ f 原点至溶剂前沿距离 y R的大小取决于溶质在二相间的分配系数及滤纸的性质。不同的组分具有不同的分配系数,因 f 而也就有不同的R，这就是定性的依据。 f 5.3 影响 R 的因素 f (1).欲分离物的本性:物质在两相的分配系数,决定了它的R大小; f (2).层析溶剂:同一组分在不同溶剂中R不同。通常应选这样的层析剂，使溶质的R在0.05~ 0.85 f f 之间,不同组分的R差值0.05。 f (3).pH:影响它们的存在状态； (4).滤纸:质地均一、厚薄适当、具有一定机械强度、不含杂质； (5).温度:在层析缸中用红外灯照射。温度会影响溶质的分配系数及流动相的扩散速度。层析操作 o 应在恒温下进行，温度不超过± 0.5C。 (6).展开方式:展开方式不同,R也不同。下行法的R最大，上行法的R较小，环行法的 R也不大。 f f f f 5.4 操作技术 5.4.1滤纸(担体) 1.滤纸的选择 a.要求滤纸质地均匀、平整无折痕边缘整齐; b.要求滤纸的纤维松紧适宜. c.滤纸的杂质含量少。 2.层析滤纸的性能与规格 3.滤纸的处理 以 0.1～0.4 mol/L HCl (或 2 mol/L HAc)浸泡数小时,除去无机杂质后,取出用蒸馏水洗净,再将 滤纸放在丙酮-乙醇(1:1)中浸泡一周时间,除去有机杂质,再取出风干备用。5.4.2.固定相 纸层析－以吸着在纤维素上的水作固定相。 反相纸层析－用甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇等作固定相。 若分离芳香油等非极性物，以石蜡油、硅油作固定相。 5.4.3.试样处理 1.试样的溶解 尽量避免用水。一般用乙醇、丙酮、氯仿等，最好采用与展开剂极性相似的溶剂。 液体样，可直接点样。 2.点样方法 a．先用铅笔在距纸条一端2～3 cm处划一条直线 （起始线）并在线上隔一定距离划一 “x”号 表示点样位置； b.点样工具：微量注射器、毛细滴管 （Φ＝0.5mm）； c.点样方法：用点样工具吸取试液轻轻与 “x”号接触，使点样的斑点直径为0.2～0.5cm,每 次点样2～20µl于滤纸上，以冷风吹干； d.干后，将纸的两边用线缝好，以圆筒形式置于层析缸中展开。 5.4.4展开 1.展开剂 a.展开剂的选择： l 欲分离物在两相中的溶解度； l 展开剂的极性； l 展开剂与欲分离物间应无化学反应； l 欲分离物在展开剂中的分配系数最好不受温度的影响； l 欲分离物在两相间的分配平衡瞬间达到； b.常用展开剂 水饱和的正丁醇