园艺专业毕业论文开题报告（水稻纹枯菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GPD）基因的克隆及功能验证）.docVIP

毕业论文开题报告 题 目 名 称 水稻纹枯菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆及功能验证 院 （系） 专 业 班 级 园 艺 专 业 学 生 姓 名 指 导 教 师 开题报告日期 题目来源 论文题目：水稻纹枯菌甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GPD）基因的克隆及功能验证 二、研究目的和意义 2.1 研究目的 水稻纹枯病菌,又称称云纹病，多在高温、高湿、高氮条件下发生。包括无性态和有性态：无性态称为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani），属半知菌亚门真菌，无孢目，是非常普遍的土传植物病原真菌该菌分布广，寄主范围大，并有半腐生的特点，不产生无性孢子，以菌丝或菌核形态存在于自然界的土壤中。为Thanatephorus cucumeris，属担子菌亚门，胶膜菌目，称瓜亡革菌。Miyake I. Studien über die Plize der Reispflanze in Japan[J]. J of the College of Agriculture, Imperial University of Tokyo, 1910, 2: 237-276. ［2Wei J C. Rhizoctonia sheath blight of rice[M]. Bulletin of the College of Agriculture and Forestry. Nanking: University of Nanking, 1934，5,6 左示敏. 水稻抗纹枯病数量基因qSB-11 Le 的精细定位、效应研究及其候选基因分析[D][博士]: 扬州大学, 2006. 孟庆忠, 刘志恒, 等. 水稻纹枯病研究进展[J]. 沈阳农业大学学报, 2001, 32(5): 376-381. 廖皓年, 肖陵生, 王华生. 水稻纹枯病发生历史及演变原因简析[J]. 广西植保, 1997, (3): 35-38. 屠艳拉. 绿木霉抗真菌代谢物及其对水稻纹枯病菌的抑制作用[D][博士]: 浙江大学, 2006. 国内外现状和发展趋势与研究的主攻方向 4.1 国内外现状和发展趋势 水稻纹枯病（Rice Sheath blight）是广泛分布于世界各主要稻区的三大水稻病害之一。该病在亚、非、欧、美各洲水稻种植国家普遍发生，一般减产10%~30%，严重时可达50%，对水稻生产威胁巨大。该病最先由Miyake[1]于1910年在日本发现，随后，菲律宾、斯里兰卡相继报道了此病，水稻纹枯病在我国发生为害的报道最早见于1934年著名植物病理学家魏景超教授[2] 的研究。该病在我国发生发展很快，上个世纪70年代以前，该病在我国仅为零星发生至平缓扩展；1970年以后则迅速蔓延，并于1980年左右在水稻种植区大面积暴发，发展成为我国水稻生产上的一种主要病害；1990年以后，该病的发生为害更为猖獗，南方稻区的发病面积比例普遍超过50%以上[3]。在1985至1990年期间，受害面积达水稻栽培总面积的47%，由此造成的损失每年超过2亿公斤[4]。根据上个世纪九十年代中期对我国南方稻区的调查，水稻纹枯病的发病面积是稻瘟病的2.07倍，造成的损失是稻瘟病的1.97倍[5]。随着高产、矮秆、多蘖良种的推广，种植密度的提高和施氮量的增加，其危害日趋严重，并且北方稻区纹枯病发生也逐渐加重。长期以来，对水稻纹枯病的防治主要依赖于化学药剂和栽培措施，但防治方法单一。由于缺乏有效的遗传转化系统，对该病的研究主要集中在病菌的分类、抗性机制、病害流行与防治等研究。 4.2 研究的主攻方向 对于立枯丝核菌的转化效率，相关报道显示也是比较低，采用合适的启动子，是能否进行高效转化的关键因素之一，因此寻找水稻纹枯病菌高效启动子是提高其转化效率的一种途径。甘油醛-3-磷酸脱氢酶( Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase, GPD)在真核细胞中高效表达，如在酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）其含量可达细胞内可溶蛋白的5%；在面包酵母中其mRNA的量占总mRNA量的2~5%。因此，GPD基因的启动子可能为一强启动子。而且在许多不同的真菌中，GPD基因启动子已经被成功地用来构建转化体系。本文通过构建细菌质粒载体pGEM1300，克隆了GPD基因上游4个启动子的同源片段，并将其通过冻融法导入农杆菌中，用潮