高中生物教学论文 5种樱桃属植物的POD、CAT和SOD同工酶分析.pdfVIP

生 物 学 通 报 2010年 第 45卷 第 2期 5种樱桃属植物的POD、CAT和SOD同工酶分析术 李学强 李秀珍 王 祥 (河 南科技 大学林 学 院 河南洛 阳 471003) 摘要 采用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶 电泳技术对 5种樱桃属植物的过氧化物酶 (POD)同 工酶 、过氧化氢酶 (CAT)同工酶和超氧化物歧化酶 (SOD)同工酶 的酶谱特征进行分析 ，结果表 明：5种樱桃属植物共 电泳 出 12条 POD 同工酶酶带、4条 CAT 同工酶酶带和 8条 SOD 同工 酶酶带；其 中，POD 同工酶酶谱具有5条共 同谱带 ，CAT 同工酶 4条 ，SOD 同工酶 5条。冬季 休 眠期的樱桃属植物 ，POD 与 SOD 同工酶谱 带的多样性 比较丰富 ，不 同植物之 间的谱 带差异 较大：而 CAT 同工酶谱 带差异不 明显。 关键词 樱桃属植物 同工酶 POD CAT SoD 中国图书分类号：O554+．6 文献标识码 ：B 随着近代育种技术的不断提高和相关科学的 EDTA的 0．05mmol／LpH7．4Tris—HC1缓冲液)，在 进展 ．使得樱桃属植物 的研究 向着形态分类 、地理 冰浴 中研磨成匀浆 。4℃条件下 8000r／min离心 分布 、解剖 、细胞学、分子遗传学等方向发展。现在 20min，取 出上清液备用。采用聚丙烯酰胺垂直平 许多樱桃属植物的形态特征 已经与前人描述产生 板凝胶电泳技术电泳 、染色、绘制酶谱 图，计算酶谱 了很大差异 ，而且 以往的形态学和生理生化指标测 相似系数 ．用 SPSS13．0统计分析软件计算欧式距 臼 定分类往往受环境因素和发育阶段 的影响，很难满 离系数 ，并建立聚类分析树状图，参照陈守 良5『的方 足分类鉴定和选育工作的需要。同工酶作为基因表 法 ，算出结合线 (L)进行分类。 达 的直接产物 ，有很高 的稳定性 ，可以很直观地反 2 结果与分析 映出品种 间的基 因差异 ．在植物种质资源研究中起 2．1 POD同工酶 的酶谱和 聚类分析 5种樱桃 到了积极作用[1-3]。本研究采用聚丙烯酰胺垂直平 属植物 的POD同工酶 电泳分析结果见图 1，整个 板凝胶 电泳技术 ，通过同工酶分析 ，对 5种樱桃属 酶谱共 出现 l2条酶带 ，分别 以P1、P2、P3、P4…… 植物进行亲缘关系鉴定 ．以期为樱桃属植物的大量 P12表示 。l2条 POD酶带 的迁移率 (Rf)变化范围 栽培和探索居群 的交配体系提供理论依据。 为0．19～0．94。由下至上看 ，酶带 P1、P2、P3、P4、P5 1 材料与方法 的 Rf分别 为 0．19、0．27、0．3、0．33、0．36，这 5条酶 1．1 试验材料 以洛阳地区冬季休眠期的樱花 、麦 带在酶谱 中出现的位点相 同，并且条带清晰 、酶活 李 、欧洲甜樱桃 、中国樱桃和欧李 5种树上生长 良 性强 ．是 5种植物共有 的特征谱带。 好 、没有病虫害的一年生健壮枝条的韧皮部为材料 。 樱桃 属的 5种 植物 1．2 试验方法 酶液 的制备参照汤章程 的方法 ： -- 极 强 带 _ 强 带 取待测植物材料 1g放入预先冷却的研钵 中，加入 —II—II 弱 带 [=] 极 弱 带 8mL提取液 (含 6mmol／L2一巯基乙醇和 5mmol／L 图 1 POD同工酶酶谱模式 图 基金项 目：河南省科技攻关项 目 “河南野生欧李种质资源 的调查 、评价和利用