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Lack of miRNA misregulation at early pathological stages in Drosophila neurodegenerative disease models 小组成员 组员： 隋 杨 201230007 杨 滨 201230023 臧新龙 201230027 关 博 201240088 introduction 迟发型人类神经退化疾病的特征是神经元的紊乱、退化、组织特异性神经元的丢失。 它们包括的疾病如老年痴呆症或者是帕金森综合症并且大多数的病症呈现更底的发生率如小脑萎缩症和额颞叶变性。 在神经退化性疾病中miRNA最近被确定起主要的作用。 在这篇文章中，我们是在果蝇模型相关的七个不同的神经退化性疾病中处理这些问题的。 在这篇文章中，我们是在果蝇模型相关的七个不同的神经退化性疾病中处理这些问题的。 MATERIALS AND METHODS 1、果蝇的培养及处理 果蝇系的选取及其培养 果蝇的液氮冻存处理 2、RNA的提取分离 冻存果蝇 果蝇头部 裂解D管 By sieving 果蝇体部 裂解矩阵珠 1 ml qiazol 用匀浆机磨碎 4°C离心10min 上清液 对照 取上清液 加三氯甲烷溶解 RNA的提取分离 RNA 3.测序和数据分析 4、蛋白质印迹（western blotting） 5、实时含量测定（REAL-TIME QUANTITATIVE RT–PCR ） 1、应用果蝇模型在早期疾病阶段研究一代的mRNA的数据分析 应用快速引诱TDP-43表达，在控制条件下，从果蝇头部得到了蛋白提取物，应用Western blot分析，人类表达基因在57KDa中表达，而在43KDa中没有表达。 results ATXN3的长度扩增的毒副性试验。加入RU486引诱获得ATXN3-Q70蛋白，使多数果蝇的寿命明显减少，存活率有50天到35天。加入RU486引诱获得ATXN3-Q19蛋白，使多数果蝇的寿命无明显减少。 ATXN1的长度扩增的毒副性试验。加入RU486引诱获得ATXN3-Q82蛋白，使多数果蝇的寿命明显减少，存活率有45天到28天。 2、应用SCAs模型对miRNA数据分析 A图可看出，正常阅读区的相关性,无诱导剂入下，总蛋白中数的分布和ATXN1-82Q蛋白的分布呈线性相关。 B图，相关性系数，出一组在0.99以下外，其他相关都在0.99以上。 由图可得，左边是头部表达大于在全身的基因编码，右边的基因变大多数是全身性表达。 3、应用PD模型对miRNA的数据分析 重复性的基因在杀虫剂的存在下，并表达没有太大的变化。并且相比起上两种模型，此模型使果蝇大量死亡。此模型中模拟了帕金森综合症。 DISCUSSION 在这项研究中，我们应用了几种果蝇的神经退行性病变模型，以观察毒性蛋白表达后，miRNA是否会表达错误。 However, no statistical significant variations in miRNA expression were observed in any of the cases. 尽管多数相关蛋白不会在miRNA改变了后表现破坏性伤害，相关蛋白却会诱导进行误转录。 * * * * * * * * * *