不同条件的固相合成分析研究毕业论文.doc

毕业设计（论文） 题目不同条件固相多肽合成的研究 摘要 多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。现在多采用固相合成法，从而大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。化学合成方法有两种，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势，现在大多采用Fmoc法合成。我们在合成过程中经常会遇到各种问题致使合成受阻肽链连接不完全，因此为使合成更顺畅，我们制定了一系列的实验来寻得合成最佳方案。从温度、反应时间、投料倍数、脱保护时间这四个方面来做探究实验。 关键词：固相合成，控制变量，温度，反应时间，投料倍数，缩合剂种类 目 录 1 绪论……………………………………………………………………………1 1.1固相多肽合成的基本原理………………………………………………………2 1.2固相多肽合成存在问题………………………………………………………3 1.3固相多肽合成的发展现状………………………………………………………3 2 实验部分…………………………………………………………………………4 2.1试剂和仪器………………………………………………………………………6 2.2反应装置图………………………………………………………………………7 2.3不同温度下的合成……………………………………………………………8 2.4不同反应时间下的合成…………………………………………………………8 2.5不同投料倍数下的合成…………………………………………………………8 2.6合成肽的切割……………………………………………………………………8 3 产物的理化性质及表征…………………………………………………………14 3.1产物理化性质…………………………………………………………………14 3.2纯度鉴定………………………………………………………………………17 3.3产物的波谱性质分析和结构表征………………………………………………17 3.4实验结果与讨论…………………………………………………………………31 4 条件实验结果及分析……………………………………………………………32 4.1对苯二酚与胺类物质反应条件优化实验的设计……………………………32 4.2实验条件的选择………………………………………………………………32 5 反应流程图………………………………………………………………………37 6 反应原理的探讨…………………………………………………………………37 结论 …………………………………………………………………………………39 致谢 …………………………………………………………………………………40 参考文献…………………………………………………………………………… 41 1.绪论 1963年，R.B.Merrifield［1］创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上，然后在此树脂上依次缩合氨基酸，延长肽链、合成蛋白质的固相合成法，在固相法中，每步反应后只需简单地洗涤树脂，便可达到纯化目的.克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难，为自动化合成肽奠定了基础.为此，Merrifield获得1984年诺贝尔化学奖.　　今天，固相法得到了很大发展.除了Merrifield所建立的Boc法(Boc:叔丁氧羰基)之外，又发展了Fmoc固相法(Fmoc:9-芴甲氧羰基).以这两种方法为基础的各种肽自动合成仪也相继出现和发展，并仍在不断得到改造和完善.　　Merrifield所建立的Boc合成法［2］是采用TFA(三氟乙酸)可脱除的Boc为α-氨基保护基，侧链保护采用苄醇类.合成时将一个Boc－氨基酸衍生物共价交联到树脂上，用TFA脱除Boc，用三乙胺中和游离的氨基末端，然后通过Dcc活化、耦联下一个氨基酸，最终脱保护多采用HF法或TFMSA(三氟甲磺酸)法.用Boc法已成功地合成了许多生物大分子，如活性酶、生长因子、人工蛋白等.???? 多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。它是分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的一类化合物,由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成。到现在，人们已发现和分离出一百多种存在于人体的肽，对于多肽的研究和利用，出现了一个空前的繁荣景象。多肽的全合成不仅具有很重要的理论意义，而且具有重要的应用价值。通过多肽全合成可以验证一个新的多肽的结构；设计新的多肽，用于研究结构与功能的关系；为多肽生物合成反应机制提供重要信息；建立模型酶以及合成新的多肽药物等。 　多肽的化学合成技术无论是液相法还是固