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南方医科大学学报 2175
2009;29(11)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% (J%South%Med%Univ) · ·
人LINGO-1aa76-319 蛋白 原核表达及多克隆抗体制备
1 2 1 1 1 1 1 1 1 1
吕 俊 鲁 辛 徐如祥 姜晓丹 胡昌辰 蔡颖谦 杜谋选 邹雨汐 秦玲莎 南方医科大学 珠江医院神
, , , , , , , , (
经外科 2 内分泌科 广东 广州 510282
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摘要 目 表达和纯化带多聚组氨酸 6 His 标签的人 LINGO-1 胞外段 hLINGO-1 融合蛋白 并制备兔源性抗
: ( × ) ( aa76-319 ) ,
hLINGO-1 的多克隆抗体 pAb 方法 利用PCR 从pCMV-SPORT6 获得hLINGO-1 编码序列 将其亚克隆至
aa76-319 ( )。 aa76-319 ,
原核表达载体pET30a(+) 构建重组表达质粒pET30a(+)-hLINGO-1 将阳性重组质粒转化大肠杆菌 IPTG 诱导表
, aa76-319 ; ,
达 6 His-%hLINGO-1 融合蛋白 经Ni-NTA 螯合树脂纯化 纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清 Protein%
, , ,
× aa76-319
A%Sepharose 柱纯化获得多抗 ELISA 法检测抗体效价 Western%blot 法检测抗体特异性 结果 成功构建了pET30a(+)
, , 。
-hLINGO-1 原核表达载体 原核蛋白hLINGO-1
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