转基因食品DNA提取研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３１（５）：１２１１２５ ? 转基因食品ＤＮＡ提取研究进展   蔡翠霞　肖维威 　康文杰　马文丽 （南方医科大学基因工程研究所　广州　５１０１５１） 摘要　为了满足消费者对转基因食品的知情权，建立准确、快速、高效的转基因成分检测技术至 关重要，而高质量ＤＮＡ模板的获取，是转基因食品进行基因检测的前提。对近几年来国内外转基 因食品ＤＮＡ提取方法：十六烷基三甲基溴化铵（ｈｅｘａｄｅｃｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，ＣＴＡＢ）法、十 二烷基硫酸钠（ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｔｅ，ｓｏｄｉｕｍｓａｌｔ，ＳＤＳ）法、聚乙烯吡咯烷酮（ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ，ＰＶＰ）法、 介质纯化法、螯合树脂法等进行了介绍，对各种方法进行综合评述并重点阐述了提取中应注意的问 题和转基因食品ＤＮＡ提取的发展方向，为初步进行ＤＮＡ提取的科学研究者提供有效的信息。 关键词　转基因食品　ＤＮＡ提取 中图分类号　Ｒ３４ 　　随着基因工程技术的日趋成熟及在农产品上的广 盐及其他杂质彻底分离去除的过程。裂解方法包括化 泛应用，转基因食品应运而生，并以惊人的速度进入人 学裂解法（表面活性剂ＳＤＳ、ＣＴＡＢ、高盐等）、酶裂解法 们的生活。２００９年全球转基因作物种植面积达到１．３４ （蛋白酶 Ｋ、溶菌酶、裂解酶等）和机械裂解法（研磨 亿公顷，比１９９６年的１７０万公顷增长８０倍，而以转基 ［５］ 等） 。最常用的纯化方法，一是有机溶剂抽提再沉 ［１］ 因作物为原材料加工的食品已达上万种 。转基因食 淀，二是介质纯化。介质纯化是利用某些固相介质，在 品给人类带来了丰富的食品供应和巨大的经济效益， 特定的条件下选择性吸附的特点，实现核酸与蛋白质 但到目前为止，转基因食品对人类健康的安全性一直 及其他杂质的分离。 受人质疑。某些转基因食品引起中毒、过敏反应、降低 　　食品成分复杂，ＤＮＡ破坏降解严重，因此从加工食 人体抵御病毒的能力、改变机体肠道菌群平衡等危害 品中提取ＤＮＡ，潜在困难很大。目前国内外很多学者 已有报道［２３］。为了保证消费者的知情权和选择权，世 在积极探索、深入研究各种高效的转基因食品ＤＮＡ提 界上的很多国家和地区先后出台了相应的法律和管理 取方法，本文就近年来国内外的有关转基因食品ＤＮＡ 方法，对转基因食品实行强制标识或自愿标识。２００２ 提取方法研究进展作综合评述。 年我国农业部颁布的《农业转基因生物标识管理办 ［４］ １　十六烷基三甲基溴化铵法 法》，规定对５大类１７种产品必须进行标识 。 　　对转基因食品进行标识基于能检测到转基因成 　　 十六烷基三 甲基溴化铵 （ｈｅｘａｄｅｃｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌ 分。因此建立准确、快速、高效的转基因成分检测技术 ａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，ＣＴＡＢ）法是一种阳离子去污剂，能与 至关重要，而高质量 ＤＮＡ模板的获取，是转基因食品 核酸形成复合物，此复合物在高盐（＞０．７ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ）浓 进行基因检测的前提和关键。 度下可溶解并稳定存在，但在低盐浓度（０．１～０．５ｍｏｌ