第18章 遗传病的诊断.pptVIP

2010-02 第十八章 遗传病的诊断 Diagnosis of Genetic Disease 概述 遗传病诊断的复杂性及基本要求：病种多，涉及各个临床专科，需要各个学科的密切配合。 1.遗传病诊断的方法： 2.诊断时间： （1）出生前诊断(prenatal diagnosis) （2）症状前诊断(presymptomatic diagnosis) （3）临症诊断(symptomatic diagnosis)。 出生前诊断和症状前诊断比临症诊断更具意义。 第一节 遗传病的常规诊断一、病史 除一般病史外，应着重了解： 1.家族史：家族中同种疾病的发病情况及分布。 家族史的作用：可画出系谱图，并结合文献研究资料初步分析该病是否为遗传病及其可能的遗传方式。 采集家族史时应注意的问题：注意患者或代述人的文化程度、记忆能力、判断能力和精神状态等是否影响到叙述的准确性和全面性。 2. 婚姻史：婚龄、婚次、配偶健康情况、是否近亲结婚，有助于了解致病基因的来源。 3. 生育史： 生育年龄（推测生育遗传病患儿的可能性大小）； 子女数目及健康状况（有助于进行系谱分析）； 有无流产、死产和早产史（推测夫妇是否为异常染色体携带者）； 有无产伤、窒息，孕早期有无患病毒性疾病和致畸因素接触史（以鉴别患者所罹患的疾病是否为遗传性疾病）。 二、症状和体征 遗传病有与其它疾病相同的症状，也有其本身特异性症候群，可为诊断提供初步线索。例如： ①智力低下，特殊腐臭尿液—— ②智力低下，白内障，肝硬化等—— ③智力低下，伸舌，眼距宽、眼裂小、外眼角上斜等体征—— ④性腺发育不全、生育力下降、原发性闭经、行为异常—— 由于遗传病普遍存在遗传异质性，若欲作出病因诊断，必须进行实验室检验。 第二节 遗传病的遗传学诊断 一、系谱分析 1.方法或程序:以先证者为线索，调查其家系中某种疾病的分布情况，绘出系谱图。 2.系谱分析的基本要求： （1）分析者必须掌握各遗传病遗传方式的基本规律和相应的系谱特征。 （2）系谱完整、准确、可靠。有三代以上家庭成员的患病、婚姻及生育情况； 3.系谱分析应解决的问题： （1）疾病类型； （2）遗传方式； （3）遗传性质； 4.系谱分析应注意的问题 （1）家系小而选样偏倚现象； （2）有些遗传因素使孟德尔式遗传病系谱变得不规律或不典型： AD：基因多效性，迟发性，显性基因不完全外显和表现度的差异，新发生的突变； AR：遗传异质性，如耳聋； XD：女性患者的症状可能比男性症状轻； XR：女性X染色体失活。 二、染色体分析 1.适于染色体分析的疾病:染色体病。 2.染色体检查的材料:外周血/绒毛/羊水/脐血/骨髓/活检组织。 3.染色体检查的指征：生长迟缓或先天畸形；智力障碍；夫妇之一有染色体异常；家族中已有染色体异常或先天畸形的个体；原因不明的死产；多发性流产；原发性不育；性发育不明等。 4.染色体检查的技术:G带， Q带，R带，C带, T带， N带，染色体原位杂交(FISH) 人类染色体端粒DNA的荧光原位杂交照片 三、生化分析 1.适于生化分析的疾病：代谢病、分子病和免疫病等。 2.常用材料：体液、活检组织、脱落细胞。 3.常用方法：主要依赖各种生化反应和蛋白电泳技术，定性、定量分析生化反应物和基因产物。 4.局限性：生化检查要求知道代谢异常的机理或基因产物；要求有相应基因表达产物的体液或细胞。 四、基因诊断 概念：利用分子生物学的技术，检测体内的DNA或RNA结构或表达水平变化，从而对疾病做出诊断的方法。 （一）基因诊断的常用方法与基本原理 1. 核酸分子杂交 （1）核酸分子杂交的基本原理：双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条件恢复后又可以碱基配对规律形成双链结构。 当溶液中的DNA分子被加热至100℃或处于高PH（PH≥13）时，靠碱基互补配对形成的双链分子打开成两条单链，这一过程称为DNA变性。 当将溶液降至65℃以下，保持一定时间，变性后的DNA单链或任何两条碱基互补的DNA单链可以很容易地再形成双螺旋结构，这一过程叫复性，也叫杂交。 核酸分子杂交技术：将一条已知序列的单链核酸片段用放射性核素或其它标记物标记作为探针，去检测、分辨互补的RNA或DNA序列，是目前分子生物学领域中最常用的基本技术之一。 （2）常用核酸分子杂交技术 DNA印迹杂交（Southern blot）:用特异的DNA探针检测DNA。常常用于克隆基因的酶切图谱的分析、基因组中基因的定性及定量分析、基因突变分析等等。 主要过程：①酶解和电泳，将被检测的DNA分子用限制性内切酶消化成若干片段，并在琼脂糖凝胶电泳上分离；②印迹，经DNA变性处理后，利用虹吸作用将凝胶中单链核苷酸序列片段转移到硝酸纤维膜或尼龙膜等固相支持物上；③将探针与