HMGB1在电离辐射诱导的细胞凋亡中的作用及机制的初步研究.docVIP

  HMGB1 在电离辐射诱导的细胞凋亡中的作 用及机制的初步研究# 凌宝勇1，时欣1，王利利2，焦旸1** 5 10 15 20 25 30 （1. 苏州大学医学部放射医学与防护学院，苏州 215123； 2. 苏州大学附属第一医院放疗科，苏州 215006） 摘要：目的：初步研究高迁移率族蛋白 B1（high mobility group box-1，HMGB1）在辐射诱 导的细胞凋亡中的作用及调控机制。方法：采用 RNA 干扰技术建立 HMGB1 低表达的细胞 模型，利用流式细胞仪检测细胞早期凋亡和晚期凋亡的发生，利用蛋白质免疫印迹（Western Blot）方法检测调节细胞凋亡关键蛋白的表达水平。结果：HMGB1 敲除组细胞经 4Gy 照射 后，与单纯转染无序 siRNA 的对照组相比，早期凋亡细胞数明显减少（P＜0.05）。Western blot 结果显示，与对照组细胞相比，HMGB1 敲除后，细胞内与凋亡相关的 caspase9 表达显 著降低。结论：HMGB1 在辐射诱导细胞凋亡中起到抑制细胞凋亡的作用，其作用机制可能 与其对 caspase9 的表达调控有关。 关键词：电离辐射；凋亡；高迁移率族蛋白 B1 中图分类号：R811.5 Preliminary study of the function and mechanism of HMGB1 on the radiation induced apoptosis LING Baoyong1, SHI Xin1, WANG Lili2, Jiao Yang1 (1. School of Radiation Medicine and Protection, Medical College of Soochow University, Suzhou 215123; 2. Department of Radiotherapy, the First affiliation Hospital of Soochow University) Abstract: Objective: To preliminary investigate the function and mechanism of high mobility group box-1（HMGB1）in radiation induced apoptosis. Methods: The loss-of-function cell model was constructed using RNA interference. Annixin V assay was used to identify the occurrence of early apoptosis and late apoptosis, and Western blot assay was utilized to detect the expression pattern of apoptosis related regulators. Results: After exposed to 4 Gy X-ray, HMGB1 suppression caused significant decreased early apoptotic cells, compared to control group （P＜0.05）. Suppressed expression of HMGB1 caused obviously decreased expression of caspase 9 protein. Conclusion: HMGB1 could regulate the radiation induced cell apoptosis, possibly through its regulation of caspase 9 expression. Key words: radiation; apoptosis;high mobility group box-1 35 0 引言 HMGB1 是 1970 年代发现的存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白，在哺乳 动物组织细胞中普遍存在，高度保守。在对电离辐射高度敏感的免疫组织——胸腺和淋巴组 织等组织中 HMGB1 呈高表达[1]。HMGB1 蛋白的核蛋白功能、炎症因子作用，以及癌基因 40 功能已被广泛研究 [2-5] 限，较为深入的机制研究十分缺乏。 细胞凋亡是指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，属于普遍存在 基金项目：基金项目：教育部博士点基金新教师类课题（20103201120016） 作者简介：凌宝勇（1990.11），男，本科生，主要研究方向：放射生物学