细胞因子信号抑制因子在骨关节炎患者软骨细胞的表达.pdfVIP

186 ChinJCellMolImmuno1)2013，29(2 · 论著 · 文章编号：1007—8738(2013)02-0186—04 细胞因子信号抑制因子在骨关节炎患者软骨细胞的表达 孙晓辉 (新乡医学院第一附属医院骨科，河南 卫辉 453100) [摘 要] 目的 研究细胞因子信号抑制因子(SOCS)1、2、3和细胞因子可诱导性SH2结构域 1(CIS—1)的基因在正常和关节炎 患者的软骨细胞表达，分析IL．113和TNF一仪对上述SOCS家族成员mRNA的表达水平的影响。方法 在晚期骨关节炎(OA)和 因车祸需要置换的关节中通过胰蛋白酶、透明质酸酶和胶原蛋白酶B消化分离软骨细胞。实时定量RT—PCR检测 SOCSI、2、3 和CIS．1mRNA的表达。健康的软骨细胞用或不用 IL．1B和 oneostatinM (OSM，2．5rig／mL)或TNF- (10ng／mL)培养。用单 个细胞因子处理24h和72h后收获短期培养的细胞；用细胞因子周期性刺激长期培养维持4～5周。定量RT-PCR检测软骨细 胞SOCS1、2、3和CIS一1mRNA的表达。结果 与对照相比，0A样本中SOCS2和CIS-1mRNA减少8倍 (P0．01)，而在OA和 健康人中SOCS1和SOCS3的表达未见明显变化(P0．05)。用 IL—lB和联合 OSM或TNF一长期处理后 SOCS2和CIS·lmRNA 减少5倍和3倍 (P0．05)。结论OA患者软骨细胞中SOCS2和CIS-1表达下调，而SOCS1和SOCS3的表达未受影响。用炎性 细胞因子长期处理软骨细胞可以模拟 OA减少SOCS2和CIS一1的表达。 [关键词]细胞因子信号抑制因子；骨关节炎 [中图分类号]R392-33，R684．3 [文献标志码]A ExpressionsofSOCS inchondrocytesofpatients、thosteoarthritis SUN Xiaohui DepartmentofOrthopedics，FirstAffiliatedHospital，XinxiangMedicalCollege，Weihui453100，China [Abstract] ObjectiveTostudythegeneexpressionsofsuppressorsofcytokinesignaling(SOCS1，2，3)andcytokine- inducibleSH2一domain1(CIS一1)inchondrocytesofosteoarthritis(OA)patientsandhealthycontrols，andalsoanalyzethe effectsofIL-113andTNF—o[ontheIevelsofmRNAencodingtheseSOCSfamilymembers．Methods ChondrocyteswereIso- latedfr0mpatientsofOAandjointreplacementduetotrafficaccidentbysequentialtreatmentwithtrypsin，hyaluronidaseand collagenaseB．T0laIRNA wasextractedfr0m thesamechondrocytes，andtheIevelsofSOCSt，2，3andCIS-lmRNAwere determinedbyreal-timeqRT-PCR．Inaddition，healthychondrocyteswereculturedwithandwithoutamixture ofIL-1Band oncostatinM (OSM，both2．5ng／mL)orTNF-a (10ng／mL)．Theshod-termcultureswithsinglecytokinetreatmentwere harvested24and72haftertreatment．andtheIong-term culturesweremaintainedfor4-5weeksuntiIconfluentwithperiodical cytokinestimulation．TotalRNAwasextractedandmRNA IevelsofSOCS1．2．3andCIS-1mRNAweredetectedb