新型纳米金荧光双标survivin反义寡核苷酸探针的合成及其对人恶性黑素瘤A375细胞的影响.pdfVIP

第34卷第 1期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．34NO．1 2013年 1月 JournalofXi’anJiaotongUniversity(MedicalSciences) Jan．2Ol3 新型纳米金荧光双标 survivin反义寡核苷酸探针的合成 及其对人恶性黑素瘤A375细胞的影响 李 萍 ，王 梅。，肖生祥 ，王 冰。，霍 佳 (西安交通大学医学院：1．第一附属医院营养科 ，陕西西安 710061； 2．第二附属医院皮肤科，陕西西安 710004；3．病理学系，陕西西安 710061) 摘要：目的 利用纳米金独特的生物和光学特性，合成一种新型纳米金荧光双标 survivin反义寡核苷酸探针，观察其 对人恶性黑素瘤 A375细胞 的影响。方法 用柠檬酸钠还原法制备纳米金 ，将巯基修饰后 的survivin反义寡核苷酸结 合在纳米金表面 ，合成纳米金 survivin反义寡核苷酸探针 ；再结合互补 的带荧光标记 的报告序列，制成纳米金荧光双 标 survivin反义寡核苷酸探针 ；将制备的探针转染人恶性黑素瘤 A375细胞 ，荧光显微镜观察细胞 内荧光图像 ，MTT 法及流式细胞仪检测A375细胞的增殖及凋亡情况。结果 制备的纳米金荧光双标 survivin反义寡核苷酸探针转染 A375细胞后 ，可观察到清晰的细胞 内荧光 图像 ，可 以抑制 A375细胞 的增殖 ，与对 照组 比较差异有统计学意义 (PO．05)，诱导细胞凋亡增多。结论 寡核苷酸功能化的纳米金颗粒可有效转染进人恶性黑素瘤A375细胞，通过 反义封闭作用诱导人恶性黑素瘤 A375细胞凋亡增多。 关键词 ：纳米金 ；反义寡核苷酸；survivin；A375细胞 中图分类号：R733 文献标志码 ：A 文章编号：1671—8259(2013)01—0020—04 SynthesisoftheprobeofsurvivinantisensOligOnucle0tidemodified goldnanoparticlesanditsimpactonA375cells LIPing，WANGMei，XIAO Sheng—xiang ，WANG Bing。，HUO Jia。 (1．DepartmentofClinicalNutrition，theFirstAffiliatedHospital，M edicalSchoolof Xi’anJiaotongUniversity，Xi’an710061；2．DepartmentofDermatology，theSecond AffiliatedHospital，MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710004； 3．DepartmentofPathology，MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710061，China) ABSTRACT：Objective To synthesize theprobeofsurvivin antisenseoligonucleotidemodifiedgold nanoparticlesby making use ofthebiologicaland opticalcharacteristicsofgold nanoparticlesand to analyze its impactonA375cells．Methods Citrate—stabilizedgoldnanoparticleswerepreparedusingpublishedprocedures． Thiol—modified01jg0nuc1eotideswereaddedtogoldcolloidstomakenano—probes．Thenthecomple