Tamoxifen作用后人乳腺癌核基质雌激素受体的变化特性1.pptVIP

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2017-09-14 发布于重庆
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Tamoxifen作用后人乳腺癌核基质雌激素受体的变化特性1.ppt

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Tamoxifen作用后人乳腺癌核基质雌激素受体的变化特性? 1卢汉平 2龙浩 2张旭 1高锦辉1 梁昌盛1中山大学基础医学院实验核医学教研室 5100892中山大学肿瘤医院胸科Email:hyxjys@gzsums.edu.cn广东省自然科学基金资助（021877） Tamoxifen（三苯氧胺）:乳腺癌内分泌治疗常用首选药物，通过靶细胞的雌激素受体（estrogen receptor，ER）起作用。肿瘤组织雌激素受体阳性的患者有效率为65%左右。核基质雌激素受体（nuclear matrix ER， EmR ）：核基质中与雌激素受体特异结合，调控靶细胞生物功能的接纳体。 EmR含量尤其是相对含量（ EmR/EnR）对反映机体激素状态有重要参考价值。研究目的：通过体外实验，观察Tamoxifen对乳腺癌细胞EmR的影响，探讨EmR在内分泌治疗中的作用材料与方法标本：新鲜手术切除标本均取自中山大学肿瘤医院，离体后置液氮保存，病理证实。主要试剂：3H-雌二醇([2,4,6,7-3H]-estradiol，3H-E2)，NEN产品,放化纯度98%，SA为2.96 TBq/mmol)。tamoxifen,Sigma产品。细胞培养：将组织剪碎至1mm3，0.05%胶原酶Ⅱ 37℃消化30min, 750×g离心5min，细胞尼龙网过滤，RPMI-1640(含10%小牛血清)培养，细胞浓度为1～2×105cell/ml. Tamoxifen体外作用：Tamoxifen作用的终浓度分别设0.2.、0.4.、1.0 ug/ml，培养24小时. 胞核悬液制备及核基质分离：匀浆离心消化提取受体分析:采用放射配体结合分析法（单点饱和结合反应）。 3H-E2终浓度为5.0nmol/L，滤膜法分离结合与游离部分。PackardTri-carb2900TR测量放射性计数. 数据处理：受体含量以fmol/100ugDNA表示，统计学处理采用t检验。结果：小结 Tamoxifen能影响核雌激素受体的表达，在低剂量时，EnR、EmR均有明显升高，可能是和Tamoxifen促进胞浆ER（EcR）的核内移有关. 高剂量时则可阻断ER，使肿瘤细胞的生长抑制。 * * ? 乳腺癌组织与癌周组织EnR、EmR含量 fmol/100ugDNA n=27 ? EnR EmR EmR/EnR 癌周组织 11.93±5.12 5.20±3.14 0.43±0.21 癌组织 52.74±32.40 38.89±21.55 0.64±0.23 1.乳腺癌组织与癌周组织EnR、EmR含量 Tamoxifen不同剂量对EnR、EmR的影响 TAM不同剂量对EmR的影响 TAM浓度 ug/ml 0.2 0.4 1.0 EnR 66.23±40.17 68.70±51.29 40.71±33.14 EmR 42.93±31.55 45.26±30.20 31.73±20.38 EmR/EnR 0.71±0.28 0.69±0.25 0.68±0.30