植入前遗传学诊断中单卵裂球固定方法的相关研究.pdfVIP

· 1790 · 安 徽 医 药 AnhuiMedicalandPharmaceuticalJournal 2012Dec；16(12) 植入前遗传学诊断中单卵裂球固定方法的相关研究 张敏敏，章志国，周 平，曹云霞 (安徽医科大学第一附属医院妇产科 ，安徽 合肥 230022) 摘要：目的 以人类受精胚胎单卵裂球为对象，对传统低渗固定法进行改良，探讨一种更简便效率更高的固定方法。方法 收 集30枚人类多精受精胚胎激光打孔后去除透明带，将获得的完整卵裂球按传统低渗固定法和直接固定法进行固定后行 x，Y 染色体双色荧光原位杂交，比较固定率和杂交率。结果 固定卵裂球共 171枚。低渗固定法(A组)固定80枚，成功68枚，成 功率为85．0％。直接固定法(B)组固定91枚 ，成功82枚，成功率为90．1％。两组差异有显著性。A组杂交率为77．5％(每卵 裂球数)，91．2％(每核数)，B组杂交率为83．5％(每卵裂球数)92．7％(每核数)。两组差异无显著性。结论 直接固定法简化 了固定步骤，降低了细胞丢失率，为较理想的单个卵裂球间期核固定技术。 关键词：固定；植入前遗传学诊断；荧光原位杂交；卵裂球 An improvementofthefixationmethodforpreimplantation genetic diagnosisbyfluorescentin situhybridization ZHANG Min．min．ZHANG Zhi．guo，ZH0U Ping，etal (ReproductiveMedicineCenter，DeptofObstetricsandGynecology，theFirstAffiliated HospitalofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230022，China) Abstract：Objective Toimprovecurrentpreimplantationgeneticdiagnosisfixationtechniquesinordertofindamoreefficientfixation methodbyusingpolyspermyembryos．Methods Atfirst，toremovethezonapellucidabylaser．TheIntegrityBlastomeresweredistribu— tedintotwogroups：conventionalhypotonic—fixationgroupanddirect-fixationgroup．Fluorescenceinsituhybridizationwasaccomplished afterfixationusingchromosomeX andY probes，andthenthefixationrateandthefluorescentsignalswereanalyzed．Result 1．A total of30Blastomereswereanalyzedand171Blastomeresfixated．Ofthe80Blastomeresinconventionalgroup(Agroup)，68gotfinefixa— tion，thesuccessfulratewas85．0％．Among91Blastomeresindirect—fixationgroup(Brgoup)，82gotfinefixation，thesuccessfulrate was90．1％．2．Inconventionalgroup，thehybridizationratewas77．5％(／Blastomere)or91．2％(／Nuclear)．Theratewere83．5％ and92．7％ respectivelywithhypotonic—fixationgroupandthedirect—fixationrgoup．TherewasnoSignificantdifference．Conclusion Thisimprovedfixationtechniqueessentiallyeliminatesthepossibilityoflosingacell