8个牛品种的大理石花纹评分相关基因变异的微卫星DNA池分析.pdfVIP

2013霉筵4@卷篱5鬻 Geneticsand Breeding·霾蕤纛蕤 8个牛品种的大理石花纹评分 相关基因变异的微卫星DNA池分析 乔冬雨1．孙志颖2，孙少华件，楚康康1，刘媛t 摘 要：本研究以8个牛品种为研究对象，利用与大理石花纹评分基因相关的7个微卫星位点结合DNA池分析 技术．探讨微卫星DNA多态性与8个牛品种大理石花纹评分间的关系，并根据性状同质性原理预测品种组合， 以加快生产出高端“雪花”牛肉。结果表明：日本和牛与荷斯坦牛、安格斯牛、渤海黑牛妁相似性系数均超过 0．8．而日本和牛与其他牛品种的的相似性系数均小于0．8。利用MEGA4软件采用邻接法进行聚类，利木赞牛与 西门塔尔牛先聚合在一起，再与草原红牛聚合；渤海黑牛与鲁西黄牛2个地方良种聚合在一起，以上5个品种聚 为第1大类。荷斯坦牛与日本和牛聚合，再与安格斯牛聚在一起，它们聚为第2大类。根据本研究结果和国外肉 牛杂交生产实践，从牛肉大理石花纹性状的同质性出发，建议利用日本和牛、荷斯坦牛为亲本，杂交生产高档 “雪花”牛肉，以解决我国的肉牛牛源短缺问题。 关键词：DNA混合池；微卫星标记；大理石花纹评分；杂交组合；牛 中图分类号：$823．2 文献标识码：A 文章编号：0258—7033(2013)05—0001—04 随着居民收入的普遍提高，膳食结构日益改善， Biometra 人们对牛肉的需求量不断增长，更重要的是消费者 PCR仪、北京市六一仪器厂DYY一12型电脑三 对牛肉质量的要求也越来越高，高档牛肉的生产无 恒多用电泳仪、BIO—RAD Company凝胶成像系统等。 法满足国内市场日益增长的需求。同时，我国有着 1．2实验方法 丰富的牛品种资源，既有优良的地方品种，又有引进 1．2．1 DNA的提取及浓度测定根据不同的组织类 的国外品种，那么利用微卫星分子标记及现有资源 型参照相关文献提取DNA，溶于双蒸水中，一20。C保 可以解决我国的牛肉产量低、质量差等问题。本研 ND一1000型紫外分光光度计准确 存备用。NanoDrop 究利用8个牛品种，选取7个与大理石花纹评分 测定每个个体的DNA浓度并将其调整到100 ng／l山L， score，MAR)紧密连锁的微卫星位点，并结每个品种选取8个个体的DNA混合成一个池，组池时 (marbling 合DNA混合池技术，从分子水平上比较几个牛品种 考虑品种内的公母比例及地域等信息。 之间在大理石花纹评分方面的差异，根据同质性原 1。2．2微卫星引物来源及序列根据Abe等[11、Casas 理进行高档“雪花”牛肉的杂交生产，为我国生产优 等p 质“雪花”牛肉提供理论依据。 分紧密连锁的微卫星位点(表1)，引物由上海生工 生物工程技术服务有限公司合成。 1材料与方法 1．2．3 PCR扩增及检测常规PCR反应体系。PCR反 1．1材料 应程序：94。C预变性5rain；94℃变性30S，58～65℃退 1．1．1 实验动物荷斯坦奶牛、西门塔尔牛、草原 火30S，72。C延伸30S，35个循环；72。C延伸5rain，4℃ 红牛、利木赞牛、鲁西黄牛、