IFN-γ联合阿霉素或依托泊苷增强TRAIL对神经母细胞瘤细胞的诱导凋亡作用.pdfVIP

2012年第39卷第7期 中国肿瘤 临床 365 lFN—Y联合阿霉素或依托泊苷增强TRAIL对神经 母细胞瘤细胞的诱导凋亡作用术 佟海侠① 郑 旭② 王 弘③ 陆春伟④ 王秋实① 马良艳① 摘要 目的：探讨半胱一天冬氨酸蛋白酶 8(Caspase8)和死亡受体 (DR)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)诱导神 经母细胞瘤 (NB)细胞凋亡中的作用。方法：应用RT—PCR方法检测 干扰素(IFN一)作用前后NB细胞Caspase8mRNA的表达； 应用Westernblot方法检测Caspase8、DR4和DR5蛋 白表达 ；应用四甲基偶氮唑蓝 (M1Tr)比色法及流式细胞术检测IFN一 ， TRAIL，IFN一 +TRAIL，Caspase8抑制剂+TRAIL及 IFN一+阿霉素／依托泊苷+TRAIL对NB细胞株生长及凋亡的影响。结果： IFN一在NB细胞株SKNDZ中诱导了Caspase8mRNA及蛋白表达。SY5Y细胞对TRAIL不敏感 ，而IFN一-,／与TRAIL或阿霉素／依托 泊苷联用对SY5Y细胞有明显诱导凋亡作用。IFN一~+TRAIL组SY5Y细胞早期凋亡率 (23．09+2．35)％高于TRAIL组 [(6．15± 0．54)％(PO．O1)]，但低于IFN一+阿霉素依／托泊苷+TRAIL组[(43．41_+6．46)％／(38．86_+7-29)％，P0．01]。阿霉素或依托泊苷可以 诱导NB细胞株DR5蛋白表达 ，但未诱导DR4蛋白表达。IFN,／诱导后表达Caspase8的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用仍 不敏感，而阿霉素或依托泊苷处理后 同时表达DR5的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用相对敏感。IFN一-y+阿霉素依／托泊 苷+TRAIL组SKNDZ细胞早期凋亡率(11．54+2．49)％／(13．38±1．65)％高于IFN一,／+TRAIL组 (P0．01)。结论：IFN一上调Caspase8 表达及化疗药阿霉素或依托泊苷诱导DR5表达可以恢复NB细胞对TRAIL的敏感性 ，Caspase8和DR5在TRAIL诱导NB细胞凋 亡中起着十分关键的作用。 关键词 神经母细胞瘤 IFN一-y 阿霉素 依托泊苷 凋亡 doi：10．3969／j．issn．1000—8179．2012．07．002 CombinationOfIFN andEtoposideorDoxorubicinEnhancesTumorNecroticFactor-related AptOpt0sis—inducingLigand-inducedApoptosisofNeuroblastomaCells HaixiaTONG，‘XuZHENG。，HongWANG ，ChunweiLU，QiushiWANG，LiangyanMA Correspondenceto：HaixiaTONG，E—mail：tonghx2009@163．com DepartmentofBloodTransfusion，ShengjingHospitalofChinaMedicalUniversity,Shenyang110022，China DepartmentofOncology,ShengjingHospitalofChinaMedicalUniversiyt,Shenyang110022，China PediatricDepartment，HematologyCenter,ShengjingHospitalofChinaMedicalUniversiyt,Shenyang110022，China SectionofHealthTesting，CollegeofPublicHealth，ChinaMedicalUniversity,Shenyang110001，China ThisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(Non Abstract 0bjective：ThisstudyaimstoevaluatetheroleofCaspase8anddeathreceptor(DR)inTNF．relateda