不同处理时间50Hz 3.6mT正弦交变磁场对人脐带干细胞增殖与成骨性分化的研究.pdfVIP

重庆医科大学学报 2012年第 37卷第 1期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2012．VO1．37No．1) 一 51一 DOI：10．39696．issn．0253-3626．2012．01．015 不同处理时间50Hz3．6naT正弦交变磁场 对人脐带干细胞增殖与成骨性分化的研究 周 建，葛宝丰，王家琪，陈克明，朱瑞清 (兰州军区兰州总医院骨科研究所 ，兰卅I730050) 【摘 要】目的：研究50Hz3．6mT不同处理时间的正弦交变电磁场(Sinusoidalelectromagneticfield，SEMFs)对体外培养人脐 带干细胞(Humanumbilicalcordstemceils，HUCSC)增殖与成骨性分化的影响。方法：体外分离培养HUCSC，传代后随机分为6 组。用频率50Hz，3．6mT的SEMFs分别每天处理HUCSC0．0(对照组)、0．5、1．0、1．5、2．0h和2．5h，倒置相差显微镜观察细胞 形态，MTr法测定细胞增殖，在磁场处理后的15d和 17d分别用茜素红和vonkossa对钙化结节进行染色 ，在磁场处理后的第 4天和第6天 PCR检测胶原 I(CoHagen—I)和骨形态发生蛋白(Bonemorphogeneticprotein一2，BMP一2)mRNA表达量的变化， 在磁场处理后的 10、12、14d和 16d测定ALP活性。结果：1．0、1．5、2．0h和2．5h组促进HUCSC增殖：磁场处理后的7-9d细 胞出现钙化结节；在 SEMFs处理后的第 14天和第 16天0．5h组和 1．0h组碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase，ALP)活性显著高 于对照；SEMFs处理组能增加HUCSC钙化面积，其中尤以0．5h和 1．0h最为明显：SEMFs能增加 Collagen—I和BMP一2 mRNA表达量，其中尤以0．5h和 1．0h组作用最为明显。结论：50Hz，3．6mT1．0、1．5、2．0h和2．5h促进 HUCSC增殖，同时 SEMFs组能促进体外培养HUCSC成骨陛分化。尤以处理0．5h和 1．0h促进成骨性分化最为明显。 【关键词】人脐带干细胞；增殖；分化；正弦交变电磁场 【中国图书分类法分类号 】R318．O8 【文献标志码】A 【收稿日期】2011-08—05 Effectsofdifferentdurationsof50Hz3．6mTsinusoidalelectromagneticfield onproliferationanddifferentjatiOnOfhumanumbilicaIcordstem cellsinvitro ZHOUJian，GEBaofeng，WANGJiaqi，CHENKeming，ZHURuiqing (InstituteofOrthopaedics．LanzhouGeneratHospitalof ) A【bstract]Objective：Toinvestigatetheeffectsofdifferentdurationsof50Hz3．6mTsinusoidalelectromagneticfields(SEMFs)on theproliferationanddifferentiationofhumanumbilicalcordstemcells(HUCSCs)invitro．Methods：TheHUCSCswereisolatedfrom theneonateumbilicalcordandrandomlydivided into6groupsafteronepassage．Thetreatmentgroupswereunder50Hz3．6mT SEMFsrespectivelyfor0．5，1．0，1．5，2．0h，and2．5heachday，whilethecontrolgroup underwentnoSEMFstreatment． Allgroups wereobservedunderthecontrastphasemicroscopeeachday．Theprolif