农杆菌介导法将大麦胚乳特异型启动子启动的小麦GBSSⅠ基因转化玉米自交系.pdfVIP

分子植物育种，2012年，第 10卷，第 1期，第30-34页 MolecularPlantBreeding，2012，Vo1．10，No．1，30—34 研究报告 ResearchReport 农杆菌介导法将大麦胚乳特异型启动子启动的小麦GBSSI基因转化玉 米 自交系 周融希 吴颖 邹宏达 苏胜忠 李世鹏 单晓辉 刘宏魁 原亚萍 ’ 吉林大学植物科学学院，长春，130062 通讯作者，yapingyuan@yahoo．com．cn 摘 要 本研究将从大麦中克隆到的大麦胚乳特异型启动子HorD和小麦中克隆到的小麦颗粒结合型淀粉 合成酶基因GBSSI(Granule-boundstarchsynthaseI，GBSSI)通过中间载体pGM．T—HorD和pGM．T—GBSSJ， 定向连接到表达载体pCAMBIA3301上，构建了植物表达载体pHorD—GBSSI并转入农杆菌EHA105，通过 农杆菌介导法转化玉米 自交系Y423体细胞胚胎，获得抗性愈伤组织，并得到了再生植株，经PCR分子检 测，共有35株呈阳性，阳性率为 15％。我们认为本研究可能为进一步改良玉米淀粉品质提供一条分子育种 的途径。 关键词 玉米(ZeamaysL．)，颗粒结合型淀粉合成酶(GBSSJ)，大麦胚乳特异型启动子(HorD)，农杆菌介导遗 传转化 Transformationof G ．S^sIGeneDrivedwithBarleyEndospemr —specific PromoterintoMaizeInbredLineMediatedbyAgrobacterium ZhouRongxi WuYing ZouHongda SuShengzhong LiShipeng ShanXiaohui LiuHongkui Yuan Yaping CollegeofPlantScience，JilinUniversity，Changchun，130062 Correspondingau~or，yapingyuan@yahoo．corn．crt DOI：10．3969／mpb．010．000030 Abstract Inpresentstudy，WemadeaplantexpressionconstructthatligatedGBSSJ clonedfrom common wheatandendosperm specificpromoterHorD from barleyintopCAMBIA3301byusingthetwobridgevector pGM—T—HorDnadpGM-T—GBSSI．thentheconsturctnamedpHorD-GBSS 1wastransfomr edintoEHA105． SomaticembryogenesisofinbredlineY423wasusedtobetransfomredbyAgrobacteriumTumefaciensmediation． Regeneratedplnatswereharvestedtobegeneticallydetected andtotalof35palnrtswerepositivebyPCR accreditation，accountingfor15％．Wethoughtthisstudymightprovideamolecularwaytoimprovethequalityof maizestarch． Keywords Maize(ZeamaysL．)，Grnauleboundstarchsynthase(GBSSj)，Barleyendospemr-specificpromoter (HorD)，Agrobacterium-mediatedtransformation 玉米(Ze口maysL．)是世界上三大谷类作物之一， 粉，高直链淀粉玉米一般是指直链淀粉在玉米淀粉 也是最重要的饲料作物，在世界粮食生产中占有重 中占玉米淀粉总含量50％~A上的玉米(张瑛等，2005)。 要的地位。淀粉是玉米籽粒中的主要积累物质，占籽 直链淀粉是重要的工业原料，在食品、医药、化工、纺 粒总重的70％左右。通常所说的玉米淀粉是指直链 织、造纸、建筑、石油化工和塑料工业等领域具有广 淀粉和支链淀粉的混合物(Xiaeta1．，2011)。普通玉米 泛的用途(王振华等，2002)。 籽粒淀粉中大约有28％的直链淀粉和 72％的支链淀 玉米淀粉合成酶中的颗粒结合型淀粉合成酶 基金项目：本研究由国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX