人CD146＋牙周膜干细胞的分选及其干细胞特性的鉴定.pdf

中耸；老年l口腔函学杂志2013年3月第lll卷第2期 CHINESEJOURNALOFGERIATRIC DEN STRY MARCH 2013VOL．t1NO．2 · 论著 · 人CD146+牙周膜干细胞的分选及其干细胞特性的鉴定 ：i： 朱文俊 谭媛元 梁 敏 【摘要】 目的：通过酶消化法及流式细胞分选技术分选 CD146+牙周膜干细胞(Periodontalligamentcells， PDLCs)，探讨其干细胞特性。方法：采用流式细胞技术从人牙周膜细胞中分选 CD146+PDLCs，并对其进行免 疫组化染色(角蛋白、波形丝蛋白及Stro-1)，成骨、成脂诱导分化及克隆形成实验鉴定其干细胞特性。结果 ： CD146+PDLCs表达波形丝蛋 白及 Stro一1，具有成骨及成脂分化能力，体外培养能形成细胞克隆。结论 ：以 CD146为分选指标的流式细胞分选技术可作为牙周膜干细胞筛选的方法。 关键词：牙周膜细胞；CD146；成骨分化 ；成脂分化 [中国图书分类号】R781 [文献标识码]A [文章编号]1672—2973(2013)02—0074—05 IsolationandidentificationofhumanCD146positiveperiodontalligamentstem cells ZHUWen—Jun． Ⅳ|Yuan—yuan．LIANGMin (DepartmentofPeriodontology,OralSubsidiarySunYat-senUniversity GuangHuaHospital,GuangdongProvincialKeyLaboratoryofStomatology,Guangzhou510055，ChinaJ A【bstract】Objectives：ToisolateandcultureCD146positiveperiodontalligamentcells(CD146+PDLCs)byusingtype Icollagenasedigestion and flow cytometric sorting，in ordertoverify thestem cellpropertiesofCD146+PDLCs． Methods：CD146+PDLCswereisolatedbyflow activatedcellsorterfiom human PDLCs．Thestem cellpropertiesof CD146+PDLCsweretestedbyimmunohistochemicalstaining，osteogenic／adipogenicinductionandcolony—formingassay． Results：CD146+PDLCs，expressingmesenchymalstem cellsurfacemarkerStro一1，wereabletoform calcium nodules／lipid dropletsunderosteogenic／adipogenicinductionandwerecapableofformingcolonies．Conclusions：CD146+PDLCsshared thesimilarpropertieswithperiodontalligamentstem cells，whichprovidinganew methodofrperiodontalligamentstem eellisolation． Keywords：periodontalligamentcells；CD146；osteogenesis；adipogenesis 2004年 Seo采用有限稀释法成功从阻生第三 明PDLSCs能再生形成包括牙周膜、牙槽骨及牙骨 磨牙上 分 离纯化 出牙 周膜 干 细胞 (periodontal 质在内的牙周组织以及外周神经、血管等组织b，。 ligamentstemcells，PDLSCs)，并发现其表达问充 目前较多研究采用 Stro-1作为牙周膜干细胞的分 质干细胞表面标志物 Stro-1及 CD146[11。相关研