枯草芽孢杆菌SH7抑菌蛋白的分离纯化及对烟草青枯病菌的.pdfVIP

中国烟草科学 2010 ，31 （1）：13-15 13 枯草芽孢杆菌 SH7 抑菌蛋白的分离纯化 及对烟草青枯病菌的抑制作用 * 张秀玉，孔凡玉 ，王 静，张成省，李佰乐 ( 国家烟草专卖局烟草病虫害监测与综合治理重点开放实验室，中国农业科学院烟草研究所，青岛 266101) 摘 要：采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析、Sephadex G-75 凝胶层析及聚丙烯凝胶电泳，从 枯草芽孢杆菌SH7 代谢物中分离纯化出一种相对分子质量为33.6 kD 的蛋白，该活性物质具有淀粉酶活力，对烟草青枯病菌 具有一定的抑制作用。 关键词：枯草芽孢杆菌；抑菌蛋白；纯化；拮抗作用 中图分类号：S435.72 文章编号：1007-5119(2010)01-0013-03 DOI: 10.3969/j.issn.1007-5119.2010.01.004 Isolation, Purification and Antagonism of Extracellular Protein from Bacillus subtilis Strain SH7 * ZHANG Xiuyu, KONG Fanyu , WANG Jing, ZHANG Chengsheng, LI Baile (Key Laboratory of Tobacco Pest Monitoring Integrated Management, State Tobacco Monopoly Bureau, Tobacco Research Institute of CAAS, Qingdao 266101, China) Abstract: Bacillus subtilis strain SH7 showed antagonism against Ralstonia solanacearum .One of the protein was purified by using ammonium sulfate precipitation followed by DEAE Sepharose Fast Flow chromatography and Sephadex G-75. The molecular mass of the protein was 33.6 kD by PAGE analysis. The active protein from Bacillus subtilis strain SH7 have diastatic activity. Keywords: Bacillus subtilis ; protein; purification; antagonism activity 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)作为植物病害 验防效较好，并初步证明了该菌产生的拮抗物质为 主要生防细菌之一，广泛分布于自然界中，因其是 蛋白类物质[9] 。本实验对 SH7 菌株产生的拮抗蛋白 对人畜无害、不污染环境的非致病细菌，备受各国 进行分离纯化，并初步研究了该抑菌蛋白对 研究工作者的青睐。很多优良的枯草芽孢杆菌菌株 Ralstonia. solanacearum 的抑制作用。 [1-3] 已经应用于农业生产 。Bacillus subtilis 在生长代 1 材料与方法 谢过程中能够产生不同种类的拮抗物质，主要为抗 生素和抗菌蛋白[4-5] 。国