型单纯疱疹病毒gD基因片段的高效表达及抗原性分析.pdfVIP

下载本文档

6
0
约 5页
2017-09-04 发布于重庆
举报
版权申诉

型单纯疱疹病毒gD基因片段的高效表达及抗原性分析.pdf

1、本文档共5页，可阅读全部内容。
2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

Ch ina Biotechnology, 2006, 26( 5): 49~ 53 gD * 易俊波雷明军陈少娟黄德新李凌云 ( 518057) 目的: 获得高表达的 I型单纯疱疹病毒(H V )被膜糖蛋白 gD (简称 gD1)基因的工程菌方法: 通过计机分析, 筛选出疱疹病毒 gD 1中优势抗原决定簇的基因片段将克隆的基因片段插入表达载体 pTrxA 内, 转化大肠杆菌Rosetta, 以异丙基D硫代半乳糖苷诱导表达十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( D PAGE)分析表达产物结果: PCR 扩增出约 930bp的 gD 1编码基因目的片段, 与预期片段大小相符, 经测序鉴定无基因突变所构建 pTrxAgD 1重组表达质粒阳性克隆经 PCR 与双酶切鉴定, 与预期结果一致含有 pTrxAgD1重组质粒的大肠杆菌 Rosetta诱导后得到了高效表达, D PAGE显示表达产物约 48kDa免疫印迹结果表明表达产物具有较好的抗原性结论: 成功构建了 pTrxAgD 1表达质粒, 实现了成熟 gD1蛋白在大肠杆菌中的高效表达, 表达产物具有好的抗原性单纯疱疹病毒糖蛋白 gD 基因克隆质粒表达 Q786 [ 5, 6] ( herpes smi plex v irus, H V) gD , H V1 , , [ 1, 2] , ,, , H V , , , , H V H V H V , gD H V , , [ 7] [ 8] , , , H V , , , H V H V1 (Western , H V blotting), H V , H V 1 [ 3] [ 3] 1. 1 H V 10 , gD gB, H V , 1. 1. 1 菌种病毒毒种及质粒 Rosetta, , , DH 5, H V1, Vero pT rxA [ 3, 4] DTH T , gD 1. 1. 2 分子生物学试剂 RPM I1640 : : * : myspacebo@ hotm ail. com GIBCO; T4DNA 50 China Biotechnology Vol. 26 No. 5 2006 ( dNTP)Ex T aq DNA BamH I 1. 2. 1 PCR 引物的计合成 H in dIII, RNA DNA Goldkey gD1 DNA Q iagen