GB/T 19915.1-2005猪链球菌2型平板和试管凝集试验操作规程.pdf

ICS07.100.30 一 一 C53 酒羚 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 19915.1-2005 猪链球菌2型平板和试管凝集 试验操作规程 ProcedureofplateandtubeagglutinationforStreptococcussuistype2 2005-09-27发布 2005-11-01实施 率督冒掣臀瓣譬馥臀臀暴发“ cB/T19915.1-2005 前 言 猪链球菌2型是链球菌属的成员，其致病菌株可致猪链球菌病，引起猪败血症、脑膜炎等。人可通 过伤口感染该菌，并导致发病和死亡。为了通过检测猪血清中猪链球菌2型的抗体，进行猪链球菌2型 病的检测和监测，特制定本标准。 本标准由国家标准化管理委员会提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。 本标准由中华人民共和国江苏出人境检验检疫局和中国检验检疫科学院负责起草。 本标准主要起草人：陈国强、张敬友、张常印、唐泰山、姜众、王凯民、林祥梅、韩雪清、吴绍强、刘建、 贾广乐、梅琳。 本标准为首次发布。 GB/T19915.1-2005 猪链球菌2型平板和试管凝集 试验操作规程 1 范围 本标准规定了猪链球菌2型平板和试管凝集试验的操作技术要求。 本标准适用于猪及其他各种家畜猪链球菌2型抗体的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注 日期的引用文件，其随后所有 的修改单 不（包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的必威体育精装版版本。凡是不注 日期的引用文件，其必威体育精装版版本适用于本标准。 GB/T6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 3 试剂和材料 3.1 试剂 3.1.1标准抗原：由指定单位提供，按说明书使用，使用时须回至室温，并充分摇匀。 3.1.2 标准阳性血清：由指定单位提供，按说明书使用，使用时须回至室温，并充分摇匀。 3.1.3 标准阴性血清：由指定单位提供，按说明书使用，使用时须回至室温，并充分摇匀。 3.1.4 试验用蒸馏水：GB//T6682-1992中的三级水。 3.1.5 稀释液：0.5％石炭酸生理盐水 含（0.5％石炭酸、0.85%NaCDo 3.2 材料 3.2.1玻璃板：要求洁净，划成每格3cmX3cm的区域，每一格下留少许位置，用于填写血清号。 3.2.2 移液器和 或（）可调连续加样器及配套的移液器枪头。 3.2.3 试管架和试管：规格为13mmX100mm，圆底，洁净。 3.2.4 被检血清：按常规方法采血分离血清，血清必须新鲜，无明显蛋白凝固，无溶血，无腐败气味。 运送和保存血清样品时，应防止血清冻结和受热，以免影响凝集价。若3天内不能送到实验室，可 用冷藏方法运送血清。试验时须回至室温。 4 操作方法 4.1 平板凝集试验 4.1.1将玻璃板上各格标上阳性血清、阴性血清和被检血清号，每格各加25uL平板凝集抗原。 4.1.2 在各格凝集抗原旁分别加人阳性血清、阴性血清和相应的被检血清25I.L, 4.1.3 用牙签或移液器枪头搅动被检血清和抗原使之均匀混合，形成直径约2cm的液区。轻微摇动， 室温下于4min内观察结果。 4.1.4 每次操作以不超过20份血清样品为宜，以免样品干燥而不易观察结果。 4.2 试管凝集试验 4.2.1稀释被检血清 4.2.1.1每份被检血