IL-6表达在实验性大鼠脑出血继发性神经元损伤及脑水肿中的作用.pdf

中文摘要 IL．6表达在实验性大鼠脑出血继发性神经元损伤及 脑水肿中的作用 摘 要 目的：脑盥(Intracerebralhemorrhage,ICH)以其高致死 率和致残率而成为严重威胁人类生命健康的重症疾病之一， 对其发病机制及治疗方法的研究成为当前热点之一，但这首 先依赖于稳定的脑出血模型的建立。大鼠尾状核自体不抗凝 动脉血注入模型为当前研究脑出血应用较多的模型，有较多 优点，尤其适合于脑出血后脑水肿的研究。脑出血后存在炎 症反应，且较非出血性损伤更加明显。炎症反应参与了脑组 织损伤及脑水肿的形成。细胞因子(Cytokine)仨1细胞介素6 强中性粒细胞的毒性，促进内皮细胞表达细胞问黏附分子 (Intercellularadhesion molecule，ICAM)，诱使化学趋化因子 升高，使更多的炎性细胞募集到病灶部位，从而加剧炎症反 应，则IL．6有可能通过介导炎症反应而参与了脑出血后急性 期的继发性神经元损伤及脑水肿。本研究拟通过对脑出血大 鼠不同时间点脑组织表达IL一6的观察，探讨IL一6表达在大 鼠脑出血后继发性脑损伤及脑水肿中的作用。 方法：利用立体定向技术建立大鼠尾状核不抗凝自体动 脉血脑出血模型(501．t l中等量脑出血)，并在脑出血后6小 时、24小时、48小时、72小时对大鼠进行行为学评分，包 Score)、肢体对称试验评分法 括Longa评分法(Longa (Footfault Asymmetry 中文摘要 Beam Score)。之后大鼠眼动 Score)、平衡木评分法(Balance 脉取血，静置离心后留取血清，分装入一20℃冰箱保存待测。 取血后大鼠断头处死，用干湿重法测相应时间点的脑组织含 水量；假手术组大鼠只进针不注血，余操作同脑出血组大鼠。 采用免疫组化方法观察出血后6小时、24小时、48小时、 72小时大鼠脑组织的IL。6表达情况；探讨其表达规律及分 布特点；常规HE染色观察大鼠脑组织的病理改变，观察基 底节区域的血肿及其周围的水肿带，神经元和胶质细胞的改 变；通过Nissl染色法对相应时间点血肿周围(包括水肿区 域)及海马两个部位未受损的神经元进行计数，了解神经元 受损情况；并用双抗体夹心酶联免疫吸附实验．ELISA试剂盒 检测大鼠不同时间点血清中IL．6的水平，了解外周血中IL．6 的表达情况。 结果：①脑出血后大鼠在不同时间点出现行为学异常， 其中6小时与对照组相比无显著统计学差异，考虑为麻醉药 品和手术创伤所致；24小时～72小时行为学异常与对照组 相比有显著意义，提示行为学异常与脑损害程度一致。②脑 组织含水量在6小时，实验组与对照组无差别，实验组24 小时脑含水量开始升高，48小时达到高峰，持续升高到72 小时，与对照组相比有统计学意义；p0．05；且血肿同侧与 对侧脑组织含水量也有差别，血肿同侧脑组织含水量高于血 肿对侧脑组织含水量；实验组24小时、48小时、72／J,H,j。与 6小时之问有统计学差别，对照组各时间点之间无统计学差 别。③免疫组化结果为阳性面积比在脑出血组6小时为9．8 ±4．6(均数±标准差)，假手术组为5．O±l_58，p=0．05，没有 显著差别；脑出血组24小时为“。O±4．30，假手术组24小时 中文摘要 为5．6±1．95，p=O．03，有统计学意义：脑出血组48小时为19．6 _-+-2．30，对照组为6．2±1．30，p=O．001，有显著差别；脑出血组 计学意义。该结果显示大鼠脑组织表达IL．6于24小时开始 升高，也于48小时达到高峰，持续升高到72小时；实验组 48小时和72小时与6小时和24小时之间有统计学差别，对 照组各时间点之间无统计学差别，pO．05。④血肿周围(包 括水肿区域)及海马的未受损神经元数于24小时开始减少 (分别为38．4±8．17和44．4±4．77)，72小时未受损