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摘要
摘要
目的:建立H9c2心肌样细胞急性缺氧/复氧(A/R)损伤模型及缺氧预适应
(APC)延迟保护模型,运用多种经典、公认的生理、生化等检测指标,在确认
模型已成功的基础上,采用RT-PCR、WesternBlotting等分子生物学检测方法来
探讨DJ.1的表达及变化规律,以期阐明APC所产生的延迟保护与DJ一1蛋白表
达的关系,并从ERKl/2信号通路的角度初步探讨APC上调DJ—l表达的信号机
制。
blotting
mRNA及蛋白的表达情况,同时用Westem
技术分别检测各实验组中DJ.1
活率:按试剂盒说明测定各组细胞内LDH的活性,MDA的含量以及抗氧化物
量变化。
结果:H9c2细胞经A/R处理后,细胞存活率明显下降、LDH活性增加、细胞
h后可显著提高A/R损伤细胞
显的氧化应激损伤。而经APC处理的H9c2细胞,24
的存活率、降低A/R损伤细胞的LDH活性,同时降低A/R损伤细胞内MDA及ROS
含量、增加ⅣR损伤细胞内抗氧化物SOD、CAT、GSH.Px的酶活性,表明缺氧预
适应能对抗A/R所诱发的氧化应激产生延迟保护。此外APC在对抗A/R所诱发的
mRNA
氧化应激产生延迟保护作用的同时,能促进ERKl/2蛋白磷酸化、上调DJ—l
及蛋白的表达水平,并且APC诱导DJ.1表达变化与APC延迟保护出现的时间窗相
消,同时APC所产生的延迟保护作用被逆转。
可能作为内源性保护蛋白参与心肌缺氧预适应延迟保护作用,其机制可能通过
DJ.1的抗氧化应激活性而得以实现。
关键词:DJ-1,缺氧预适应,延迟保护,ERKI/2,缺氧/复氧损伤
ABSTRACT
ABSTRACT
objective:
Weestablishedthe anoxia
anoxia/reoxygenation(A/R)and
of cellsderivedfromrat anddetectedthe
H9c2
(APC)models cardiomyocytes
in to
ofDJ一1 lH—PCRandWestern order the
expression by blotting clarify
betweenthe fromAPCandDJ一1
relationships delayedcardioprotection
resulting
elucidateits mechanismofAPC
expre
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