利用木糖和葡萄糖合成乙醇的新型重组大肠杆菌的研究.pdfVIP

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卷 期 !! 微 生 物 学 报 ’( )!! 0’ ) 年 月 #$$! %$ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,’-./ #$$! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 利用木糖和葡萄糖合成乙醇的新型重组大肠杆菌的研究 孙金凤 徐 敏 张 峰 王正祥 (江南大学生物工程学院分子生物学研究室和工业生物技术教育部重点实验室 无锡 #%!$D1 ) 摘 要:利用 方法从运动发酵单孢菌染色体 扩增出乙醇合成途径的关键酶基因 、 ,分别用 启 EFG H0I ! # $% J $# 动子控制表达,构建了可以在 中表达的重组质粒 、 。初步的乙醇发酵结果表 ’(#%)*+#%+$ #,-+ KL%$2 MNN5EI M7,9+5EI 明,在 中只引入 基因不能拓宽其中的产乙醇途径,引入 基因可以与宿主自身的 酶协同作用, ’ ) #,-+ $% J ! # IHO 使碳流有效导向产乙醇方向。同时引入 、 基因可以在宿主 中成功建立产乙醇途径。 ! # $% J ’ ) #,-+ 关键词:重组大肠杆菌,乙醇,发酵 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) P64 I $$$%51#$2 #$$! $5$1$$5$ 在微生物糖酵解过程中,细胞将简单的己糖和 $% J 的重组’ ) #,-+ 能够在无诱导物存在的情况下 戊糖代谢产生共同的中间产物丙酮酸,然后再转化 有效地利用葡萄糖和 或木糖生成乙醇。 S 为各种发酵产物如乙醇、乳酸等。大肠杆菌( ’(. ! 材料和方法 #%)*+#%+$ #,-+ )能够利用其天然的代谢途径分解己糖 和戊糖,产生酸性和中性产物如乳酸、 和 (甲 F* O ! ! 菌株和质粒 # # 酸)、乙酸、乙醇、琥珀酸等。但其缺乏有效代谢丙酮 质粒 MTF%4 购自上海生工生物工程技术服务 酸为乙醛的丙酮酸脱羧酶,使得其乙醇合成能力十 有限公司;质粒MNN##D5D 购自0**U707 公司;质 [ ] 分微弱。运动发酵单孢菌( )能够

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