转基因玉米MON863品系特异定量PCR方法的建立.pdfVIP

第 50卷第 24期 湖 北农 业 科学 Vo1．50No．24 2011年 12月 HubeiAgriculturalSciences Dee．．2011 转基因玉米MON863品系特异定量PCR方法的建立 宋 君 ，雷绍荣 a，刘 勇 ，尹 全 ，王 东 ，张富丽 ，刘文娟 ，常丽娟 (N)ll省农业科学院，a．分析测试中心Ib．植物保护研究所 ，成都 610066) 摘要 ：根据转基 因玉米 MON863外源基 因的旁侧序列 ，设计 引物和 TaqMan探针 ，建立 了转基 因玉米 MON863品系特异定量 PCR检测方法 ．并采用该法检测 了 1％含量的M0N863玉米粉末 (不确定度为 10％)。结果显示 ，采 用构建 的方法获得 的标 准 曲线斜率 为一3．6--3．1，相 关 系数 大于 0．99，扩增 效率 为 102．2％。在 90％～1lO％内。样品的定量检测结果 1．113％接近 已知含量 1％(不确定度为 l0％)，表明建立 的转基 因玉米 M0N863品系特异定量 PCR检测方法的灵敏度和准确度高．可 以在 日常检验 中推广应用 关键词 ：M0N863；zSS1Ib：旁侧序列 ；定量检 测 中图分类号：S513；Q503 文献标识码 ：A 文章编号：0439—8114(2011)24—5250—04 EstablishmentofEvent-specfiicQuantitativePCR ofGeneticallyModifiedMaize (Zeamays)EventMON863 SONG Juna，LEIShao-rong*,LIU Yongb，YIN Quan，WANG Dong~，ZHANG Fu-IP,LIU Wen-juana，CHANG Li-juan (a．AnMysisandTestCenter；b．InstituteofPlantProtection，SichuanAcademyofAgriculturalSciences，Chengdu 610066，China) Abstract：Event-specificquantitativePCR detectionmethodofgeneticallymodifiedmaize (EventMON863)wasestablished． PCR primers and Taqman probe were designed according to the flanking sequence of exogenous gene ofEvent MON863． Sample (CRM) containing1％ ofEventMON863 (uncertaintywas10％)wastested．Theresultsshowedthattheslopeof standard curve obtained was in therange of一3．6--3．1．Correlation coefficientwas greaterthan 0．99：And the amplification efficiencyofthismethodwas90％-110％(averagedat102．2％)．The detection resultofsamplewas 1．113％，closedtothe truecontent (1％)．Itwasprovedthatthe sensitivityand precision ofthismethod wasrelativelyhighandcould beused to testGMO samples． Keywords：eventMON863；zSSllb；flankingsequence；quantitativedetection MON863转基 因玉米是美 国孟 山都公司 2003 盟批准将这种转基 因玉米用于动物饲料 ．2006年 1 年投放市场的转基因产 品，具有 防、抗虫害能力 。 月批准其用于人类食 品 M0N863