IDA型固定化镍离子金属螯合亲和膜色谱对人血清白蛋白的分离纯化.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$$ ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$$ - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! !#型固定化镍离子金属螯合亲和膜色谱对 人血清白蛋白的分离纯化 杨 利 贾凌云 邹汉法 张玉奎 （中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心 大连 ） !!$!! 摘 要 采用自制的固定化镍离子亚氨二乙酸（ ）型复合纤维素金属螯合膜色谱对药用人血清白蛋白的进一步 678 纯化进行了研究。考察了 对 吸附效果的影响。经一步纯化，商品药用 中的许多杂蛋白可被除去，经 : :8; :;8 9 毛细管电泳分析，纯度与 公司的电泳纯 相当，回收率可达 以上。纯化蛋白液中的镍离子经过自制 ;+ :;8 14? = 的 ，， 三羧甲基乙二胺（ ）型螯合柱处理后可较好地除去。 ) ) )@2 AB7 关键词 亲和色谱，膜，人血清白蛋白，纯化，金属螯合 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） C1!3D0 8 !$$$25$!#$$$$!2$$E32$3 ［ ］ 人血清白蛋白（ ， ）是 蛋白 （ ）的快速分离分析 !$!!# 。本文采用自 :-+,FG.- +’H-,:;8 M 6M = 临床上治疗休克、失血过多等病症的常用药剂，对其 制的复合纤维素膜为载体，固定化金属螯合配基 纯度要求很高，传统的制备方法是冷乙醇沉淀 #J为亲和配基对商品药用 的进一步纯 6782) :;8 ［］ 法 ! ，经此法纯化的白蛋白需在稳定剂的存在下进 化进行了研究。 ［，］ 行热处理以钝化肝炎病毒。有报道用亲和色谱#5 ［］ $ 材料和方法 3 和亲和分配法 分离纯化 。染料配基亲和色 :;8 ［］ 谱也成功地应用于 4 仪器 :;8 的分离纯化 。固定在琼 $%$ 脂糖凝胶上的金属螯合配基如亚氨二乙酸（ ）