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* * 1.1 DNA重组技术的基本工具 问题引领 1、基因工程的定义 2、基因工程的三种工具名称 3、限制酶的来源、种类、作用、结果 4、DNA连接酶的种类、作用 5、质粒的特点、标记基因的作用 6、载体必备的5个条件、种类 基因工程的概念 原理 目的 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的生物类型和生物产品 基因重组 基因工程概念的分析 DNA重组技术的基本工具 “分子手术刀”-- “分子缝合针”-- “分子运输车”-- 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 载体 一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1、来源: 主要是原核生物(约300种) 2、种类: 3、作用: 4、结果: 约4000种 识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 形成两种末端 黏性末端 平末端 1、EcoRI只能识别GAATTC的核苷酸序列且 只能从G和A之间切开,画出切割结果: 2、SmaI只能识别CCCGGG的核苷酸序列且只 能从C和G之间切开,画出切割后的结果: GAATTC CTTAAG EcoRI CCCGGG GGGCCC SmaI 练习: 3、课本P6的“模拟制作” 4、P7“思考与探究”第1题 1、种类: 2、作用部位: E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 磷酸二酯键 二、 DNA连接酶——“分子缝合针” (黏性末端) (黏性末端和平末端) GAATTC CTTAAG EcoRI 练习: GAATTC CTTAAG EcoRI ( ) 三、载体——“分子运输车” 1、载体的作用 将 转移到受体细胞中去。 目的基因 2、常用的载体 质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 3、作为载体必须具备的5个条件 练习:1、画出一个载体模式图 2、P7“思考与探究”的第2-4题

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