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卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( *# 年 月 $%%$ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-./-01-2 $%%$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 钙离子对鼠角质细胞生长和分化的影响 于海强 周 燕 华 平 谭文松 (华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 $%%$4F ) 摘 要 利用无血清培养基培养角质细胞,研究了 $ H 对鼠角质细胞生长和分化的影响。实验结果表明,培养基 G; 中钙离子最佳浓度为% I$00()J K。在此浓度下,细胞克隆形成率达到 !% IL ,细胞的贴壁率达到$ IF L ,细胞的分 化比例和老化比例分别为 和 ;当 $ H 浓度达到 以上时,则会引起角质细胞显著的分化和老 # I7 L $5 I4L G; % I500()J K 化。 关键词 角质细胞,细胞培养,细胞分化,细胞老化 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) M!4 I ! 6 !%%%34%5! $%%$ %#3%5$53%7 皮肤组织中的角质细胞是一种定向干细胞,在 !# 细胞传代培养 体外培养过程中很容易发生分化和衰老,导致体外 当细胞长满方瓶底面积的F# L 时,加入 !I#0K 寿命很短,因此如何在体外大量扩增具有活性和功 的% I$# L 胰酶进行消化。当细胞变圆、脱落后加入 能的角质细胞一直是皮肤组织工程中亟待解决的课 等量小牛血清终止胰酶活性。细胞悬液用 $%%% 题。表皮细胞中的钙离子梯度(基底层最低,颗粒层 的速度离心 后倒去上清, 清洗 遍, 2J0A #0A TU, $ 最高)说明钙离子对角质细胞的生长和分化起了重 加入无血清培养基。该角质细胞无血清培养基以 [] 要的调节作用! 。许多学者发现钙离子是人角质细 VGWU!#4 为基础培养基,添加$%%DJ0K 庆大霉素和 胞发生分化的必要条件,参与许多分化过程,例如角 ( ), 胰岛素, 氢 !%AXJ0K =8: V-2CY # XJ0K % I7 XJ0K ! ! 质细胞的层化、桥粒的组装以及转谷氨酰氨酶的活 化可的松, 转铁蛋白和 Z # 乙醇胺 !0XJ0K

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