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胸膜肺炎放线杆菌 $./01 基因插入失活突变株构建及免疫原性分析
徐福洲，史爱华，陈小玲，杨 兵，王金洛
（北京市农林科学院畜牧兽医研究所 北京 %%%’ ）
摘 要：胸膜肺炎放线杆菌是引起猪传染性胸膜肺炎（ ）的呼吸道病原菌，其分泌的 毒素是最重要的毒力因
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子之一。为构建 0
突变弱毒菌株，在 基因下游 酶切位点处插入氯霉素抗性基因（ ）制备转移载体，
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通过电转化导入 血清 型参考菌株（ ）进行同源重组，筛选获得 基因插入突变菌株 4 0 。
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该突变菌株特性鉴定结果表明其溶血活性完全丧失，可正常增殖和分泌 毒素，连续 次传代后基因组中插入
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的 0 基因可稳定遗传，利用 个剂量（ H ? ）对每组 只小鼠腹腔攻毒结果显示突变菌株毒力
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较母源菌株降低至少 倍以上，将突变菌株作为弱毒活疫苗经滴鼻途径免疫仔猪后利用 血清 型（ ）和
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血清 型（ ）菌株攻毒进行免疫原性鉴定，结果显示血清 型攻毒后非免疫组 头仔猪全部死亡而免疫组
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头中死亡 头，非免疫组肺损伤指数（ ）显著高于免疫组（ ），血清 型攻毒后非免疫组肺损伤指数（ ）也
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高于免疫组（ ），同时鼻拭子和肺组织样品的细菌重分离数及 检测阳性数非免疫组也明显高于免疫组，表
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