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2002 5 22 3 Ch in J V et S ci May 2002Vol.22No.3 209
-4 24
BJ ORFs
*
谷 红, 杨汉春 , 郭 鑫, 陈艳红 ( , 100094)
: 采用RT -PCR 扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4 株糖蛋白基 ORFs2 ～4,并对其进行了克隆和序列测定。
用序列分析软件分析了其编码产物的分子量、信号肽、糖基化位点、穿膜区、抗原表位、等电点及疏水性等分子特征, 为
体外高效表达基 ORFs2 ～4 编码产物GP 、GP 、GP 和进一步探讨其功能与作用奠定了基础。
2 3 4
: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORFs2 ～4; 克隆与分析
: S852. 65; Q78 :A : 1005-4545(2002) 03-0209-04
( Porcine reproductive and 1min,54. 4 1 min, 72 2 min, 33 ,
respiratory syndrom virus PRRSV, ) RNA , 72 10 min ORF; 4,94 1 min,57. 1 1
, 15 kb, min, 72 2 min, 33 , 72 10 min
8 (ORFs) , ORFs57 1. 2% PCR
( ) ( M) 1. 5. 3 目的基 的克隆与鉴定T -A , pG M-
( ) , 24 3 , 29 000
N ORFs T asy Vector System PCR
GP 42 000GP 31 000GP [ 13] GP GP GP 3 pG M -T asy , JM 109
2 3 4 2 3 4
3 ,, coR ,
, PRRSV BJ-4 ORFs24 , ,PCR
cDNA , 1. 5. 4 目的基 的序列测定及分析
, pG M -T asy T 7SP6
,
Goldkey DNAsis Prosis
1 材料与方法
[4, 5]
1. 1PRRSV BJ-4 ,
[ 5]
.2
HS H 2 结果
1.2 pG M-T asy VectorE .coli
JM 109, Promega 2. 1
1.3 RNA T RIZOL LS Reagent, RNA PCR , ORF2ORF3
GIBCOBRL ; AM V, Promega ; Taq ORF4 (ORF2 969 bp,ORF3856 bp,
DNA , Sangon ;DNA , ORF4
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