凡纳滨对虾幼体胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的研究.pdfVIP

凡纳滨对虾幼体胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的研究 杨奇慧，周歧存，马丽莎，迟淑艳 (湛江海洋大学水产学院，广东湛江524025) 摘要:以酶学分析方法刚定了凡纳滨对虾(LtopenaeusmnnameiBoone)渗状幼体 (Z2),糠虾幼体 (呱)和仔虾 (P,)胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的变化。结果表明，在凡纳滨对虾幼体发育过程 中，胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力逐渐增大，表现为Z2M2R，各期类胰蛋白酶的活力均比同 期的胃蛋白酶活力高5倍左右，在食性转换过程中，即P,酶活力比Z2酶活力和M2酶活力显著 升高 (P0.05)，其中各期类胰蛋白酶活力的递增幅度均大于胃蛋白酶。说明了不同发育阶 段，凡纳滨对虾胃蛋白酶和类胰蛋白酶的活力变化差异显著。 关键词:凡纳滨对虾(LitopenaeuszannameiBoone);幼体;胃蛋白酶;类胰蛋白酶;活力 中图分类号:5917 文献标识码:A 文章编号:1000一3096(2005)05一0006一04 凡纳滨对虾(LitopenaeuszannameiBoone)，在分类 取样后，立即放入冰瓶中，然后用预冷的双蒸水冲 口 上属于节肢动物门，甲壳纲，十足目，游泳亚目，对虾 洗样叩 ，并用滤纸吸干水分，置于冰箱 (一20`-)中保 科，对虾属[I]。凡纳滨对虾具有生长快，肉质鲜美，出 存备用 肉率高，广盐性，耐高温等优点，是当今世界公认的最 1.2 方法 有养殖前途的3大优良虾种之一。目前，虽然凡纳滨 1.2.1 样品制备 对虾的育苗工作已具有一定的技术水平，但由于缺少 准确称取样品0.3--0.5g,放入已烘干的玻璃匀浆 对幼体的消化生理和营养需求的研究，导致在人工饵 器中，并加入25倍体积预冷的双蒸水，置于冰浴中匀 料特别是开口饵料的配制和合理投喂等方面仍存在着 浆。匀浆液在0-2C,9000r/min，冷冻离心30min，弃沉 许多盲目性，最终影响凡纳滨对虾苗种的产量和质 淀，取上清液用作胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的测定。 量。因此，开展虾类幼体不同发育阶段消化生理特别 1.2.2 胃蛋白酶和类胰蛋白酶的活力测定 是消化酶活力变化的研究具有重要的意义。目前，关 胃蛋白酶和类胰蛋白酶的活力测定参考刘玉梅 于虾类消化酶的活力变化，国内已有一些报道，如对 法2[[1酶液的蛋白浓度:用福林一酚试剂法测定n[[，以 于中国对虾(PenaeUSchienisis)12,31、日本对虾(Penaeus- 牛血清白蛋白作标准曲线。 jaPnicus)4[1、罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)e[钓 搔状幼体、糠虾幼体和仔虾阶段胃蛋白酶和类胰蛋白 1.2.2.1 样品活力测定 酶的活力变化均有研究。但对于凡纳滨对虾幼体胃蛋 取酶液0.4niL后，加入0.5%干酪素溶液2inL, 白酶和类胰蛋白酶活力的比较研究则较少6{1因此，对 0.04mol/L的EDIA一Nat0.1nL,0.2rnol/L柠檬酸 凡纳滨对虾幼体食性转换明显的3个阶段:Z2,M2和 缓冲液(州=3.0)0.4mL，再加入重蒸水0.6rnL,混匀 P,，胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力的测定，可为凡纳滨对 置于37℃水浴中15min，取出。然后加入30%三氯乙酸 虾人工饲料研发提供数据依据，同时也有助于从消化 1mL，在。一2r-，3600r/min，冷冻离心15min,取上清液 生理的角度探讨凡纳滨对虾育苗的养成与营养需求的 1mL，先加入5rnL0.55mol/LNa2CO藉液，再加入1ML 关系，为提高苗种产量提供科学参考。 福林试剂乙溶液，混匀置于37℃水浴15min，用