水稻黑条矮缩病毒第七号片段的cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达.pdfVIP

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2017-09-03 发布于重庆
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水稻黑条矮缩病毒第七号片段的cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达.pdf

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卷期 ! ! 微生物学报 ’( )! /’ )! 年月 #$$ % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,+-. #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 水稻黑条矮缩病毒第七号片段的!#$ 克隆及其在大肠杆菌中的表达钟永旺周洁庄斌全魏春红李毅（北京大学生命科学学院北京 1$$%81）摘要：运用技术，根据玉米粗缩病毒的末端序列设计引物，从玉米粗缩病感病材 J65KLJ M0 料中克隆得到一条# N#BO 长的DP/* 片段，序列分析表明，该片段全长#14OA，含两个开放阅读框，分别编码!1N$BP 和0 NBP 的多肽。序列分析结果表明，该DP/* 片段及其编码产物与水稻黑条矮缩病毒M8 的DP/* 序列及编码产物存在最高的相似性，推测该DP/* 片段为水稻黑条矮缩病毒的片段，而不是玉米粗缩病毒的。分别将该片段的两个阅读框克隆到原 M8 M0 核表达载体A6#15C 及AQR5SQ 中，经TK6Q 诱导后，两种蛋白均得到了高效的表达。表达产物回收后制备并得到了高效价的抗血清。关键词：水稻黑条矮缩病毒，原核表达，，序列分析 J65KLJ 中图分类号：文献标识码：文章编号：（） U44 N!0 * $$$150#$4 #$$ $!5$!!#5$0 水稻黑条矮缩病毒（，）属于呼肠孤病毒科（ JD7 O(:DB5-.V7:B7C CI:VW XV+- JYMP J7’X5 VC:7）斐济病毒属（），同属的还有斐济病毒（，）、玉米粗缩病毒 9ZXV+- 9Z C-7:-7 XV+- 9P （，）及燕麦不孕矮缩病毒（，）等。在 [:G7 V’+,H CI:VW XV+- [JP \:. -.7V(7 CI:VW XV+- \MP 自然界中，水稻黑条矮缩病毒只能通过携带病毒的飞虱（）以持久性的 !#$%’() *+,-+%.* ［］ 1 方式传播。在中国，不但侵染水稻，而且侵染玉米，实际上引发中国玉米粗缩病 JYMP ［，］ # 的病原正是水稻黑条矮缩病毒。水稻黑条矮缩病毒的基因组由个双链（ 1$ J/* P’+5 ，）组成，按照在胶上迁移距离由小到大的顺序依次命名为：