西瓜果腐病种子带菌的PCR检测研究[1].pdfVIP

( ) 第 26卷 　第 12期 　2007年 12 月 　　　　　　　　　　种 　子 　 Seed 　　　　　　　　　　Vol. 26　No. 12　D ec. 　2007 西瓜果腐病种子带菌的 PCR 检测研究 宋顺华 , 　郑晓鹰 , 　李 丽 (北京市蔬菜研究中心 , 　北京 100089) 摘要 :基于传统的 PCR 检测技术 ,研究了西瓜果腐病种子带菌的 PCR 检测方法 。结果表明 ,磷酸缓冲液更适合于作为带 菌种子的浸提液 , PV PP可去除种子残留物 ,提高检测的灵敏度 。使用本检测方法 ,摇培时间在 2 h 以上时 ,其时间的长 短不影响自然感染带菌种子的检测 ;能检测到的西瓜种子最低带菌率为 1‰,即 1 000粒种子中存在 1粒带菌的种子 ;而 且能对 自然感染的单粒种子进行检测 ,得到种子样品带菌率的数据 。本研究所获得的检测方法简便实用 ,能有效应用于 西瓜商品种子西瓜果腐病菌的检测 。 关键词 : 　西瓜果腐病 ; 种子带菌 ; PCR 检测 中图分类号 : 　S651　　　文献标志吗 : 　A 　　　文章编号 : (2007) 120024 04 D etection ofA c idovorax avenae sub sp . c itru lli in W aterm elon Seed U sing Ploym era se Chain R eaction SO NG Shun hua, ZHENG X iaoy ing, L I L i (B eij ing V egetab le R e search Cen ter, B eij ing 100089 , Ch ina) A b stract:B a sed on the cla ssical PCR techn ique, the te sting m ethod for detection ofA cid ovorax avena e sub sp. citru lli in waterm elon seed ha s been reported here. It wa s shown that PB S wa s more su itab le to extract bacteri al from waterm elon seed s and PV PP cou ld d ispo se of seed re sidue and imp rove the te sting sen sitivity. The tim e did not influence re su lts of te sting for waterm elon seed s infected by natu re when it is over 2 hou rs. The te sting sen sitivity can reach 1‰ of infected seed s, nam ely there wa s 1 infected seed in 1 000 seed s. 1 infected seed can be te sted and the data of infected seed s p ercen t can be got w ith th is m ethod. Th is demon strate that the m ethod in th is study is simp le and p racticab le and can be u sed to detection A ac in waterm elon seed s. Key words: 　A c id ovorax avenae sub sp. citru