免疫组织化学技术制片的规范和质量控制.pdfVIP

　第 13 卷第 2 期 中 国 组 织 化 学 与 细 胞 化 学 杂 志 Vol 13No. 2 　2004 年 6 月 CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISTRY AND CYTOCHEMISTRY J un. 2004 免疫组织化学技术制片的规范和质量控制 梁英杰 ( 中山大学基础医学院病理教研室 , 广州 510080) 　　　　 〔关键词〕　免疫组织化学 　　 〔中图分类号〕　R331 　　 〔文献标识码〕　A 　　随着免疫组织化学技术的不断发展 , 该技术在 20min 。 组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应 3. 载玻片的处理 用越来越广泛 。科学地规范免疫组化技术的操作对 组织切片贴在载玻片上进行免疫组织化学染 保证免疫组化制片质量 , 提高临床病理诊断水平 , 色 , 由于染色过程操作步骤及冲洗次数较多 , 容易 促进病理学研究工作的发展有着重要的意义 。 出现脱片现象 , 因此将载玻片涂胶或硅化是必要 影响免疫组化染色结果的因素很多 , 除了免疫 的。较常用效果较好的是硅化玻片 。 组化染色操作因素外 , 还包括组织切片制备各个环 31 　硅化玻片的制备 节的因素 。因此 , 免疫组化技术的操作规范也要包 311 　载玻片经酸洗 , 冲洗干净后烤干 。 括组织切片技术的规范 。 312 　2 %APES 丙酮溶液浸 1～2min 。 1. 免疫组织化学技术对组织切片的要求 313 　无水丙酮液浸 1～2min 。 免疫组织化学技术适用于冰冻切片和石蜡切 314 　蒸馏水浸洗 1～2min 。 片 , 部分抗体只能用于冰冻切片 , 大部分抗体可用 315 　烤干备用 。 于石蜡切片 , 适用于石蜡切片的抗体也适用于冰冻 可用无水酒精代替无水丙酮 , 也可以直接配成 切片 。冰冻切片能很好地保存组织抗原 , 抗原丢失 APES 水溶液使用[1 ] 。 少 , 但形态结构差 , 定位不很清晰 ; 石蜡切片组织 APES ( 3aminoprop yltriethoxysilane) 氨丙基 形态结构好 , 定位清晰 , 但在组织的固定 、脱水 、 三乙氧基硅烷 　Sigma 产品。 包埋等过程中容易破坏组织抗原 , 使抗原的免疫活 4. 组织切片前处理 性有所降低 。因此在检测石蜡切片组织抗原时 , 尽 经福尔马林溶液固定 , 石蜡包埋的组织在固定 可能保存组织抗原的免疫活性十分重要 。 过程中 , 组织的抗原蛋白与甲醛产生交联 , 使得组 2. 组织的固定 织中抗原的决定簇被封闭 , 抗体难以和抗原充分结 组织离体以后应及时取材固定 , 组织经过固定 合 。因此要进行组织切片前处理 , 目的是打开组织 后可保存组织原有的形态结构 , 防止组织抗原弥