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实验六 双波长分光光度法测定复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶唑的含量 一、实验目的 1．掌握双波长分光光度法测定原理。 2．学习双波长分光光度法在复方制 剂分析中的应用。 二、基本原理 当吸收光谱重叠的a、b两组分共存时，若要消除a组分的干扰测定b组分，可在a组分的吸收光谱上选择两个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定混合物的吸光度差值。然后根据ΔA值计算b的含量。 磺胺甲噁唑（SMZ）在257nm波长处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定波长（λ2），在304nm波长附近选择参比波长（λ1）。 每片中含SMZ的毫克数 由于参比波长对测定影响较大，故采用对照品溶液来确定。此波长可因仪器不同而异，测定时应仔细选择。 三、实验内容 1、供试品溶液的制备（教师准备） 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg与甲氧苄啶10mg)，置于100mL量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 二、对照品溶液的制备（教师准备） 精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲噁唑对照品50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分别置于100mL瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液(1)与对照品溶液(2)。 三、磺胺甲噁唑的测定 精密量取供试品溶液与对照品溶液(1)，(2)各2mL，分别置于100mL量瓶中，各加0.4％氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。 再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值(ΔA)，计算，即得。 四、操作注意事项 测定之前应先检查仪器波长是否准确。 五、思考题 1．双波长分光光度法测定复方制剂有何优点? 2．应用双波长分光光度法应如何选择测定波长和参比波长? * * 复方磺胺甲噁唑片的处方为： 磺胺甲噁唑（SMZ） 400g 甲氧苄啶 （TMP） 80g 制成1000片 每片含SMZ：360~440mg(Chp 2000) A257＝AS，257＋AT,257 A304＝AS，304＋AT,304 ΔA＝ A257－ A304 ∵AT,257＝AT,304 ＝AS，257－AS，304 ＝ΔEC SMZl ΔA与CSMZ有线性关系。 在λ2与λ1两波长处分别测定供试品溶液与SMZ对照品溶液的吸收度，求出供试品溶液吸收度差值(ΔAx) 、 SMZ对照品溶液的吸收度差值(ΔAs) ，计算，即得。 Cs = 0.505mg/ml W称=0.06960g W=552.64mg 取对照品溶液(2)的稀释液，以257nm为测定波长（λ2），在304nm波长附近(每间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长(λ1)，要求ΔA＝Aλ2－Aλ1＝0。 *