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在不同溫度下鯉魚肌肉細胞中不同M-CK的分部位置 中央研究院動物所 吳金洌老師實驗室 891657 許儀彬 孫熙文: 研究鯉魚適應環境溫度的調節機制。激酸激酵素 (creatine kinase) 是體內能量定的關鍵酵素,並由生理分析得知鯉魚肌肉內激酸激酵素的表現與活性與溫度有相關性。 吳自律 劉承雯 張天麟、林大暉 學姊的protocol 撈魚 冷凍切片 殺魚 30um 取肉 15um 去鱗去皮去骨 Blocking 固定 染色 4% paraformaldehyde 一抗 二抗 包埋 觀察 OCT 共軛焦螢光顯微鏡 我的protocol 撈魚 包埋 取肉 切片 去鱗 去皮 去骨 1um 固定 60~90nm 4% paraformaldehyde 2.5% Glutaraldehyde in 0.1M Cacodylate buffer 脫水 染色 50%,70%,80%,90%,95%,100%酒精 100%丙酮 滲透 TEM觀察、照相 100%Acetone:LR white=1:1 100%Acetone:LR white=1:3 pure LR white 紅肉與白肉的不同 很多動物體內都含有紅肉與白肉 如:魚類、鳥類、人類 紅白肉的分布位置 在不同的動物身上有不同的分布位置 紅白肉的差別 基本組成以及功用都有所不同 為什麼要有白肉 減少心臟的負荷,但特定部位仍使用紅肉 製作用具 技術學習 玻璃刀 固定 玻璃切割 切膠囊、切片 膠帶黏貼 染色技巧 封蠟 使用TEM 木籤 削薄木棍 睫毛筆 固定睫毛 感想 整個實驗從頭做到尾的感覺很不錯,包括決定實驗的題目到所有實驗的進行,很有連貫性。 實驗室裡面的人感情很好,很喜歡這間實驗室的感覺。 要跟你喜歡的,以及喜歡你的學長做實驗,不然會很痛苦。 兩個月來我在實驗室最重要的責任是帶來歡樂的氣氛。學長姐說我離開實驗室之後,實驗室就變得很安靜無趣。 * *

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