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中国农学通报 2011,27(13): 126-129
Chinese Agricultural Science Bulletin
高质量的滇重楼胚总RNA的提取方法研究及LD_PCR检测
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郑 娜 ，祁建军 ，孙 鹏 ，秦民坚 ，李先恩
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（中国药科大学中药学院，南京222100 ；中国医学科学院/ 中国协和医科大学/药用植物研究所，北京100094）
摘 要：探讨一种有效提取滇重楼胚总RNA 方法。以滇重楼的胚为试验材料，将常规的SDS提取植物总
RNA 的方法做了改进：在RNA 提取缓冲液中加入SDS 的步骤上进行了调整，结合异丙醇和醋酸钠室温
沉淀能更有效的去除多糖；醋酸-醋酸钠的缓冲体系维持提取液较低pH 值，有效抑制RNA 酶活性；将
SDS 的浓度提高到5% ，并结合酸酚/氯仿抽提去除蛋白质污染，首次建立了一种简单有效的从滇重楼胚
中提取总RNA 的方法。该方法所提RNA 的A260/A230 均大于2.0 ，A260/A280 的值为1.8~2.0 ，电泳条带清晰，
RNA 完整性好。利用该方法提取的滇重楼幼胚总RNA 具有很高的纯度和质量，可以满足后续LD-PCR
及文库构建等分子生物学研究。
关键词：滇重楼；多糖；蛋白；总RNA ；提取
中图分类号：Q75 文献标志码：A 论文编号：2010-3297
AnEfficientMethodforTotalRNAExtractionandLD_PCRDetection
ofParispolyphyllavar.yunnanensis
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ZhengNa,QiJianjun,SunPeng,QinMinjian,LiXianen
1
(School of TCM,China Pharmaceutical University,Nanjing210009;
2Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences,
Peking Union Medical College,Beijing100094)
Abstract: TheaimwastoextractRNAfrom Paris polyphylla var. yunnanensis andlayafoundationfor
studying the formation mechanism of Paris polyphylla var. yunnanensis. By modifying the method
recommendedbySDS/phenolforextractingtotalRNAfromplanttissuerichinpolysaccharidicandprotein
compounds,asimpleandconvenientmethodforextractionoftotalRNAfromtheembryoofParispolyphylla
var.yunnanensis containingabundantpolysaccharidesandproteinwasestablished.InRNAextractionbuffer
adde
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