BCG-CpG-DNA对A群脑膜炎球菌多糖疫苗的免疫佐剂作用.pdfVIP

94 中国医药生物技术 2010 年 4 月第 5 卷第 2 期 Chin Med Biotechnol, April 2010, Vol. 5, No. 2 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.02.003 ·论著· BCG-CpG-DNA 对 A 群脑膜炎球菌 多糖疫苗的免疫佐剂作用 赵爱华，李凤祥，贾淑珍，寇丽杰，乔来艳，王国治 【摘要】 群脑膜炎球菌多糖疫苗为上海生物制品研究所产 目的 探讨免疫佐剂 BCG-CpG-DNA 对 A 群脑膜炎球菌 品；96 孔酶标板为美国 Costar 公司产品；辣根过 多糖疫苗的作用。 氧化物酶（HRP ）标记的羊抗小鼠 IgG 、IgG1 、IgG2a 方法 将不同剂量（5 、10、100 µg）的免疫佐剂 BCG- 为美国 Southern Biotechnology Associates.Inc 产公 CpG-DNA 与 A 群脑膜炎球菌多糖疫苗直接混合后，皮下 司品。酶标仪为美国 BD 公司产品。 免疫小鼠，与未添加佐剂疫苗比较，ELISA 法检测抗原特 1.2 方法 异性 IgG 抗体水平，并分析抗体亚类 IgG1 和 IgG2a 的 1.2.1 动物分组及免疫 A 群脑膜炎球菌多糖 水平。 疫苗与不同剂量的 BCG-CpG-DNA 混合，总体 结果 BCG-CpG-DNA 能提高 A 群脑膜炎球菌多糖疫苗 积 100 µl ，头背部皮下免疫 BALB/c 小鼠，每组 12 只，对照组为未添加佐剂的单纯疫苗组。多糖 特异性抗体 IgG 水平，并能促进抗原特异性抗体亚类的产 生，其中佐剂中、高剂量（10、100 µg）实验组 IgG 、IgG2a 疫苗注射量为 2.5 µg 每只动物，佐剂低、中、高 水平与未加入免疫佐剂疫苗之间差异有统计学意义。 剂量组分别为 5 、10、100 µg 每只动物，隔 1 周 免疫，共免疫 3 次。 结论 BCG-CpG-DNA 对 A 群脑膜炎球菌多糖疫苗有免 1.2.2 抗多糖抗体及抗体亚型检测 末次免疫后 疫佐剂作用。 7 d，摘眼球取小鼠血液，离心 1500 ×g ，15 min 分 【关键词】 BCG-CpG-DNA ； 免疫佐剂； A 群脑膜 离血清，ELISA 法检测多糖特异性 IgG 抗体及 炎球菌多糖疫苗 IgG 抗体亚型。A 群脑膜炎球菌多糖疫苗包被 中国医药生物技术, 2010, 5(2):94-97 96 孔酶标板，1 µg/100 µl/孔，4 ℃ 过夜，1% 牛 血清白蛋白（BSA ）室温封闭 1 h ，加入待检测血 近年来，CpG-DNA 成为新型免疫佐剂的研究 热点[1-10] 。除了人工合成的 CpG 寡核苷酸（CpG 清，37 ℃ 作用 2 h ，洗板，加入 HRP 标记的羊抗 小鼠 IgG 、IgG1 、IgG2a，37 ℃ 作用 1 h ，OPD 显 ODN ），原核生物 DNA 是 CpG-DNA 的主要来