高效液相色谱荧光法同时测定小鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质.pdfVIP

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第31卷第8期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vo1.31,No.8 2009年 4月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Apr.2009 675 文章编号:1000-5404(2009)08.0675.04 论著 高效液相色谱荧光法同时测定小鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质 桂 莉 ,田 洪 ,郑 健 ,段 炜 ,叶 枫 (第 军医大学:新桥医院神经内科,重庆400037,军事预防医学院防化 医学教研室,重庆 400038) 摘 要:目的 采用高效液相一荧光检测技术建立一种稳定的用于测定脑组织中多种氨基酸类神经递质的方法。方 法 用微透析技术收集小鼠脑组织中多种氨基酸类神经递质,用邻苯二甲醛 (OPA)柱前衍生高效液相色谱 (highperform— anceliquidchromatography,HPLC)法测定微透析液中天门冬氨酸 (Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、y-氨基丁酸 (GABA) 的含量。结果 兴奋性 Asp、Glu及抑制性 Gly、GABA在 18nlin内完全分离,在 0.625~5Ixmol/L浓度范围内与峰面积有 良好的线性关系。结论 HPLC法快速、准确 、灵敏度高,适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定。 关键词:高效液相色谱 ;柱前衍生;微透析;氨基酸 ;神经递质 中图法分类号:R322.81;R345.17;R446.1 文献标识码 :A Simultaneouslydeterm ining4 am ino acidneurotransmittersin m icebrainbyhigh- performanceliquid chromatographywith fluorescencedetector GUILi,TIAN Hong,ZHENG Jian ,DUAN Wei,YE Feng (DepartmentofNeurologv,XinqiaoHospita1,ThirdMilitary MedicalUniversity,Chongqing400037; DepartnmntofChemicalDefense,CollegeofMilitaryPreventiveMedicine,ThirdMilitaryMedical University,Chongqing400038,China) Abstract:Objective ToestablishastablemethodofHPLC—FLtodeterminemuhi—aminoacidsinthe micemicrodialysate.Methods Thesamplewascollectedbymicrodialysis.Fouraminoacidneurotransmitters, Asp.Glu.GlyandGABA inthemicrodialysateweredeterminedbyreversephaseHPLC withfluorescencede. tectionafterO-Phthaldehyde (OPA)pre—columnderivatization.Results Excitatoryaminoacids.Aspand Glu,andinhibitm7aminoacids,Glyandgamma—aminobutyricacid(GABA)weretotallyseparatedanddeter— minedwithin 18 rain.A good linearresponsewasobtained forthe4 standardsoverthe range of0.625 to 5~mol/Lwithcorrelationcoefficients.Conclusion 0urmethod iSquick.reliableandsensitivetomeasure theaminoacidnea!rotransmittersinmicebrain. Key words:high

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