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金黄色葡萄球菌对碘伏和戊二醛抗性及其机制研究 中文摘要 【目的】 二醛两种消毒剂的抗性； (2)探讨金黄色葡萄球菌携带qac(A／B)基因与其对碘伏、戊二醛抗性的 关系； (3)探讨金黄色葡萄球菌对抗生素耐药总程度与消毒剂抗性的关系； (4)探讨在亚致死剂量诱导作用下金黄色葡萄球菌对碘伏、戊二醛抗性 变化趋势。 【方法】 一、实验方法 以临床连续收集的103株金黄色葡萄球菌为实验菌株，进行最小抑菌浓度 测定、最小杀菌浓度测定、悬液定量杀灭实验：运用PCR法对每株细菌进行 qac(A／B)基因的检测；采用区组随机法将qac(A／B)基因为阳性的金黄色葡萄 球菌随机分成两组，首先随机消除一组菌株的qac(A／B)基因，然后再消除另 外一组菌株的qac(A／B)基因，并进行前后比较；亚致死剂量诱导金黄色葡萄 球菌ATCC6538 30代，观察其对碘伏、戊二醛抗性的变化趋势。 二、统计方法 采用SPSSl5．0软件，对抗性率数据进行卡方检验，对最小抑菌实验、最 小杀菌实验数据进行多个独立样本的秩和检验(K—w检验)：对悬液定量杀菌 实验数据进行重复测量设计的方差分析(协方差分析)：对抗生素耐药总程度 和杀灭对数值数据进行秩相关(spearman相关)。 【结果】 一、标本情况 共收集103株金黄色葡萄球菌，MRSA67株(65．05％)，MSSA36株(34．95％)。 8株金黄色葡萄球菌携带qac(A／B)基因，阳性率为7．67％。 二、碘伏对金黄色葡萄球菌杀菌作用 (一)碘伏对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度 l 值为判断标准，抗性率为13．8％；对59株MRSA最小抑菌浓度：3株MIC值为 基因的金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度：4株MIC值为75．Omg／1、4株MIC值为 75．Omg／1，抗性率为100．0％。3组的最小抑菌浓度差别具有统计学意义 的两两比较，P值均小于0．017。 (二)碘伏对金黄色葡萄球菌最小杀菌浓度 基因的金黄色葡萄球菌最小杀菌浓度：8株MBC值为75．Omg／1，抗性率为100％。 3组的最小杀菌浓度差别具有统计学意义(H=63．589，PO．05)。进一步采用 两两比较法(Bonferroni法)作菌数间的两两比较，P值均小于0．017。 (三)碘伏对金黄色葡萄球菌杀灭效果 含有效碘40mg／1的碘伏对MSSAI、3、5、7分钟平均杀灭对数值分别为 对携带qac(A／B)基因的金黄色葡萄球菌1、3、5、7分钟平均杀灭对数值分别 作菌数间的两两比较，P值均小于0．05。 (四)碘伏对质粒消除前后的金黄色葡萄球菌杀灭效果 对质粒消除前的金黄色葡萄球菌l、3、5、7分钟平均杀灭对数值分别为 葡萄球菌l、3、5、7分钟平均杀灭对数值分别为3．85±0．15、4．93_+0．32、 5．76±0．49、6．45±0．61。两组平均杀灭对数值差别具有统计学意义 2 (F=164．153，PO．05)。 (五)碘伏对金黄色葡萄球菌杀灭对数值与其对抗生素耐药总程度相关 性 碘伏作用1分钟对金黄色葡萄球菌杀灭对数值与其对抗生素耐药总程度 秩相关系数为-0．704，具有统计学意义(PO．05)：碘伏作用3分钟对金黄色 葡萄球菌杀灭对数值与其对抗生素耐药总程度秩相关系数为-0．753，具有统计 学意义(P0．05)：碘伏作用5分钟对金黄色葡萄球菌杀灭对数值与其对抗生 素耐药总程度秩相关系数为一0．761，具有统计学意义(P0．05)：碘伏作用7 分钟对金黄色葡萄球菌杀灭对数值与其对抗生素耐药总程度秩相关系数为 一0．664，具有统计学意义(P0．05)。 (六)碘伏对亚致死剂量的作用下连续消毒30代(诱导作用)金黄色葡 萄球菌ATCC6538的结果 75．Omg／1。 三、戊二醛对金黄色葡萄球菌的杀菌作用 (一)戊二醛对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度 株携带qac(A／B)基因的金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度：8株MIC值为 250．OOmg／l，抗性率100％。3组的最小抑菌浓度差别具有统计学意义 两两比较，P值均小于0．017。 (二)戊二醛对金黄色葡萄球菌最小杀菌浓度