Sy-9 DNA的粗提取与鉴定.docVIP

DNA的粗提取与鉴定 一、教材分析 本实验既是对组成细胞化合物的验证，也是加强学生对细胞中化合物的提取原理、方法、技巧的理解掌握，同时还是历年来各种考核的热点。因此，本实验的成功与否关系重大。 教材首先介绍了该实验的“实验原理”: (1)DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变进行提取。 (2)利用DNA不溶于酒精而细胞中的某些物质能溶于酒精进行提纯。 (3)利用DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色进行鉴定。 教材接着说明了DNA的粗提取与鉴定的“目的要求”: 要求学生初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。 教材第三部分清楚地列出了该实验的 “材料用具”: 特别是所列酒精、蒸馏水、柠檬酸钠溶液、氯化钠溶液、二苯胺试剂，在实验中一定要搞清楚它们的作用。 教材第四部分更为详细地介绍了该实验的“方法和步骤”。 从取鸡血细胞、DNA的提取过程，一直到用二苯胺进行鉴定点滴不漏地作了说明。 为此，我们从如下几方面对该实验做了本质性的准备: 1.知识结构的联系:明确鸡血细胞的结构和物质组成，它是由细胞膜、细胞质、细胞核构成；细胞核又包括核膜、核液、核仁、染色质(染色体)；染色质主要是由DNA和蛋白质组成的，所以要想对DNA进行提取，必须把细胞弄破，然后采用相应的原理和方法才能提取出来。 2.相关知识的迁移:掌握该实验的知识点，对巩固《生命的物质基础》(核酸)、《生物的生殖和发育》(减数分裂、受精作用过程中DNA含量的变化)、《遗传和变异》以及“基因工程”打下较好的理论基础。 3.实验操作的关键:该实验成败的关键是提取。 一则选材:鸡血细胞核DNA含量丰富且易得；鸡血细胞很易吸水胀破。 二则氯化钠浓度变化: DNA的粗提取中必须通过几次准确的氯化钠浓度变化方可，否则提取的量不足。所以教师必须精心设计，认真组织，否则，实验难以成功。 二、教学目标 1.知识目标： (1)获得鸡血细胞的方法(B:识记)； (2)提取鸡血细胞核物质的方法(C:理解)； (3)提取含杂质较少的DNA的方法(C:理解)； (4)DNA鉴定的方法(C:理解)。 2.能力目标： (1)理解相关溶液的作用机理，培养学生的分析能力； (2)通过DNA的粗提取，培养学生的动手能力。 三、重点·实施方案 重点： 1.掌握DNA的粗提取与鉴定的技术； 2.理解各步骤中的实验原理。 实施方案： 1.对每小组进行关键步骤的指导； 2.对每关键步骤的原理进行分析讲解。 四、难点·突破策略 难点： DNA的粗提取 突破策略： 1.板书DNA的粗提取程序和重要环节； 2.诱导学生理解各种溶液的用途或作用。 五、实验原理： 1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有DNA的溶液； 2.DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol／L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出； 3.DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质则可以溶于酒精，利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA； 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 六、材料用具 1.材料： 鸡血细胞液；预冷的95%的酒精溶液；蒸馏水；质量浓度为0.1 g／mL的柠檬酸钠溶液；物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L的氯化钠溶液；二苯胺试剂。 2.用具： 铁架台、铁环、镊子、三角架、酒精灯、石棉网、载玻片、玻璃棒、滤纸、滴管、量筒、烧杯(不同大小)、试管、漏斗、试管夹、纱布。 七、操作指导 指导学生预习:结合教材的知识结构和实验目标预习该实验内容，从理论上掌握鸡血细胞的获取；鸡血细胞核物质的提取及纯化和鉴定方法。 指导学生提取: (1)让鸡血细胞在低渗溶液中吸水胀破、释放最多的DNA。 (2)让DNA处在0.14 mol/L的氯化钠溶液中尽可能地析出。 (3)用预冷的95%的酒精尽可能除去其他细胞物质，得到更纯化的DNA。 八、课时安排：l课时 十、教学过程 导言 提问: 1.DNA的化学组成和主要功能是什么? 2.DNA主要存在于细胞的什么结构中? 3.为什么说染色体是遗传物质的主要载体? 上一节课我们学习了染色体是遗传物质的主要载体，且通过两个经典实验证明了DNA是遗传物质。那么细胞中是否有DNA呢?这节课通过实验证明。 教学目标达成 实验十一 DNA的粗提取和鉴定 教师展示:制鸡血细胞液(加抗凝剂)→获得鸡血细胞(离心或静置)→获得鸡血细胞核物质(提核物质→溶解→析出→溶解→析出)→鉴定DNA(用二苯胺) I.提取血细胞(柠檬酸钠、离心) Ⅱ.提取核物质(蒸馏水、过滤) Ⅲ.用NaCl提取