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五、实验室常用培养基的配制方法.doc
五、实验室常用培养基的配制方法
Ampcillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)
组份浓度 100 mg/ml Ampcillin
配制量 50 ml
配制方法 1.称量5 g Ampcillin置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。
3.用0.22 μm过滤膜过滤除菌。
4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。
IPTG-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)
组份浓度 24 mg/mL IPTG
配制量 50 mL
配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。
3.用0 22 μm过滤膜过滤除菌。
4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存。
X-Gal (20 mg/ml)
组份浓度 20 mg/ml X-Gal
配制量 50 ml
配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。
2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50 ml。
3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。
LB培养基
组份浓度 1%(W/V)Tryptone,.5%(W/V)Yeast Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaC配制量 1 L
配制方法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中。
Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L。
5高温高压灭菌后,4。C保存。
LB/Amp培养基
组份浓度1%(W/V) Tryptone 0.5%(W/V) Yeast Extract 1%(W/V) NaCl 0.1 mg/ml Ampicillin 配制量 1 L
配制方法 1.称取下列试剂,置于l L烧杯中。
Tryptone 10 g Yeast Extract 5 g NaCl 10 g 2.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加5 N NaOH(约0.2 mL)。调节pH值至7.0。
4.加去离子水将培养基定容至1 L。
5.高温高压灭菌后,冷却至室温。
6.加入1 ml Ampicillin(100 mg/ml)后均匀混合。
7.4℃保存。
1.2%(W/V) Tryptone 2.4%(W/V) Yeast Extract 0.4%(V/V) Glycerol 17mM KH2PO4 72mM K2HPOa TB培养基 组份浓度
配制量 1.L
配制方法 1.配制磷酸盐缓;中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌溶解 后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌。
2.称取下列试剂,置于l L烧杯中。
Tryptone 12 g Yeast Extract 24 g Glycerol 4 m 3.加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
4.加去离子水将培养基定容至1 L后,高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时,;加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。
TB/Amp培养基
组份浓度
1.2%(W/V) Tryptone 2.4%(W/V) Yeast Extract 0.4%(V/V) Glycerol 17 mM KH2PO4 72 mM K2HPO4 0.1 mg/ml Ampicillin 配制量 1 L
配制方法 1.配制磷酸盐缓冲液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。
溶解2.31 g KH2PO4,和12.54g K
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