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绿叶中色素的提取和分离实验 【课标扫描】 绿叶中色素的提取和分离（b级）：原理、注意事项 【知识网络】 【重点难点】 1．绿叶中色素的提取和分离实验 ： ⑴实验原理：叶绿体中色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以用无水乙醇可提取叶绿体中色素。色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸上扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。 ⑵实验步骤： ①提取色素：称取5克绿色叶片并剪碎，加入少量SiO2、CaCO3、和10mL无水乙醇迅速充分研磨→过滤（单层尼龙布）→滤液收集到试管内并塞紧瓶口（色素的提取实验中：研磨时加CaCO3的目的是：防止研磨中色素被破坏。加SiO2的目的是：研磨得充分） ②制滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角。并在距这一端1Cm处用铅笔画一条细的横线。 ③画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀的画出一条细线，待滤液干后，再画一两次（这样可以增大滤液细线中色素的量，使色素带更加清晰） ④分离叶绿体中色素：（用纸层析法：分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。） ⑤观察实验结果： 滤纸条上从上到下四条色素带依次是：胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色）、叶绿素a（蓝绿色）、叶绿素b（黄绿色）。 ⑥实验注意：为避免过多的吸入层析液中的挥发性物质，本实验应在通风条件下进行，实验结束时及时用肥皂洗手 【注意事项】 材料的选择：选新鲜浓绿嫩叶（既好研磨，又含色素较多）；不可取全叶（应除去叶柄和主叶脉） 色素研磨应迅速、充分：___________________________________ 提取色素时加入少量SiO2的作用:有助于研磨___________________,从而提取较多的______________ 提取色素时加入CaCO3作用: 防止研磨中色素被破坏,叶绿体中的色素所处的环境是弱碱性的,实验中由于研磨会使细胞的结构遭到破坏,细胞液(微酸性)流出，酸性的细胞液接触叶绿素的色素，致使叶绿素的分子结构遭到破坏，使叶绿素失镁，呈现黄褐色，加入少许CaCO3是为了中和__________________的酸性,起到保护___________的作用。 滤液收集后，要及时用棉塞将试管口塞紧，以免滤液__________ 剪取定性滤纸时,注意双手尽量不要_____________纸面,以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去______________,这样可以使色素在滤纸条上扩散_______________,便于观察实验结果 用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀的画出一条细线,待滤液干后,再画一两次,这样可以增大滤液细线中色素的量,使色素带更加清晰 画滤液细线要越细越好,避免层析出来的色素出现___________________现象 分离色素时,一定不要让滤液纸条上的滤液细线接触到层析液___________________________________________________________________ 【结果分析】 1请在滤纸条上画出四条色素带的分离图 从色素带的宽度可知色素的含量的多少依次是_______________________________ 从色素带的位置可知在层析液中的溶解度大小是________________________________ 在滤纸上相邻两条色素带之间的距离最近的两条色素带是_________________________距离最远的两条色素带是______________________ 2如出现一下情况可能的原因是__________________________________________判断的依据是___________________________________________________________________ 3如出现以下情况可能的原因是_________________________________________________ 4请在滤纸上画出在缺镁的营养液中长期培养的番茄叶片叶绿体中色素分离图 【能力测试】 1 叶绿体色素的纸层析结果显示,叶绿素b位于层析滤纸的最下端，原因是（ ） A 分子量最小 B 分子量最大 C 在纸层液中的溶解度最小 D在纸层液中的溶解度最大 2 叶绿体中色素的提取和分离实验主要证明了（ ） A 色素分布在叶绿体片层结构薄膜上 B叶绿素含量是类胡萝卜素的四倍 C叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色 D四种色素扩散速度不同 3 某同学在做“绿叶中色素的提取和分离”的实验