抗烟草黑胫病菌的菌株ZY-19-2的鉴定及发酵条件研究.pdfVIP

广两烟荦：学会2011年学术年会论文集——原料保障篇 抗烟草黑胫病菌的菌株ZY一19—2的鉴定 及发酵条件研究 邓宾玲，韦建玉，奚家勤，尹启生，宋纪真，周汉平。魏春阳 摘要：烟草黑胫病是烟草上重要毁灭性病害之一，生产上主要采取综合防治措施，包括种植 抗病品种，农业防治、病害发生期的药剂防治，以及生物防治和植物诱导抗性的利用等，后两者已 成为当前综合防治的研究重点。生物防治是烟草黑胫病防治最主要的手段之一．从烟草根际土样中 分离、筛选得到一株对烟草黑胫病菌有抑制作用的菌株ZY-19-2，为了评价该菌株利用价值，对菌 株zY一19—2进行了鉴定及不同培养条件下该菌株产几丁质酶的活力。结果表明：该菌株为淡紫拟青 霉；该菌株的最佳发酵条件以1．2％胶体几丁质为碳源，发酵液初始pH值为6．0，以1％蛋白胨为氮 r／min，最高 源，O．1％oi温80作为表面活性剂，发酵时间为60h，接种量为1{i，摇床转速为120 酶活达到0．216U／mL．通过对菌株ZY-19-2发酵条件的优化，为应用该菌株规模化生产高效廉价的 几丁质酶、凡丁质寡糖及对烟草黑胫病防治奠定基础。 关键词：菌株ZY-19-2；鉴定；发酵条件 引言 控制烟草黑胫病的危害也难以奏效。目前生产上 烟草黑胫病是烟草的毁灭性病害，该病于 常用化学药剂防治烟草黑胫病，但是由于烟草是 1896年首先在印尼爪哇发现。现已遍布世界各叶用经济作物，对烟叶的外观和内在质：景有特殊 产烟国。该病多发生成株期，也有少数苗床期发 的要求，因此，农药残留、病原菌耐药性以及对 生．病害导致植物生长减弱．甚至全株死亡。高 卷烟健康与卫生的影响大大限制了农药的大规 温高湿有利于病害的流行，在多雨年份及低洼地 模利用。生防防治以其低毒、无残留、对环境友 区，该病发展蔓延很快，在1~2周内使烟田毁灭。 好等成为研究的热点。几丁质是由N一乙酰氨基 造成绝收。生产上主要采取综合防治措施，包括 葡萄糖组成的大分子物质，是植物病原真菌细胞 种植抗病品种、农业防治、病害发生期的药剂防 壁和昆虫体壁的主要组成成分；几丁质酶和几丁 治，以及生物防治和植物诱导抗性的利用等¨。21． 质二糖酶能将几丁质降解成几丁质寡糖和单糖， 但是，许学明Ⅲ、刘刚“1、黄成江哺1等人研究表 从而破坏真菌的细胞碴，起到防治真菌性病害的 明，由于烟草黑胫病病原菌高度适应烟草根部环 作用，许多微生物都能产生几丁质酶。据不完全 境，致使在烟草的整个生育期均可感病。加之推 统计，已发现产生几丁质酶的微生物约有46属， 广的抗病品种仅抗某一些生理小种或仅抗某些 近70种妊1．有关微生物几丁质酶的研究国内外 病害，结果诱使致病菌生理小种发生改变。导致 已有不少的报道，刘爱新等‘7研究表明，几丁质 品种抗性丧失。因此在实际防治中利用抗病品种 酶、B-I，3一葡聚糖对烟草赤星病等多种病原真 广西烟草学会201 1年学术年会论文集——原料保障篇 菌有不同程度的拈抗作用。但从烟草根际十壤中 留上清液备用。 分离产几丁质酶微生物并应用于烟草真菌性病 1．6菌株发酵种子培养 害的防治方面的报道却较少。2004--2006年， 籍者从安徽、河南、福建、湖北、云南等采集 条件下培养4天。用接种环在平板上挑取一块菌 100个烟草根际土样，通过分离、筛选得到一株 丝接种到装有100mL液体发酵种了培养基三角 对烟草黑胫病菌有较强抑制作用的菌株 瓶中，在260C、120r／min摇床中培养72h作 ZY一19—2哺1。此文鉴定了菌株ZY-19-2并研究了为液体种子。然后以1％的(v／v)的接种量接入 该菌株的发酵条件，为规模化生产高效廉价的几 盛有100mL产酶培养基三角瓶中，在260C、120 丁质酶、几丁质寡糖及应