第二章激动素和N6-异戊烯基腺嘌呤的电化学发光行为研究.docVIP

电化学发光增强法高灵敏度检测双酚A 蒋晓华(1邱彬21，栾崇林1 （1．深圳职业技术学院，深圳 518055；2．福州大学化学化工学院，福州 35000） [摘要] 了双酚A对钌联吡啶电化学发光的增强行为，在优验条件下，钌联吡啶的电化学发光增强值与双酚A的浓度在9.3×10-9 ～4.0×10-7 mol·L-1之间呈线性(= 0.9948），检限达6.0×10-10 mol·L-1回收率为 ~ 110.0%，相对标准偏差（n=5）为3.0% ~6.7%。[关键词] 双酚A；钌联吡啶；电化学发光引言 环境内分泌干扰物（EDCs）是一些人工制造或是自然产生的化学物质，它能干扰内分泌系统的正常功能，对有机生物体的健康造成不良影响。双酚A（BPA，图1）是工业上合成聚碳酸酯、环氧树脂、聚砜树脂、聚苯醚树脂、不饱和聚酯树脂等多种高分子材料的有机化工原料，是常见的环境内分泌干扰物之一[1]。BPA不但具有破坏甲状腺激素作用的潜在能力，而且能引起人类前列腺癌细胞的扩散，还能在低剂量时阻止睾丸激素的合成。因此，BPA对生命体健康的影响和环境风险的评价受到极大关注。 图1. 双酚A的化学结构式 Fig 1. the structure of bisphenol A 当前，检测BPA的方法主要有高效液相色谱法，液质联用分析法，气相色谱分析法，气质联用分析法，毛细管电泳分析法，免疫分析法，光谱分析法等。其中色谱法和毛细管电泳技术灵敏准确，但价格昂贵，操作繁琐，难以现场检测；免疫法简化了样品前处理步骤，但抗体的制备较复杂且技术难度大，假阳性率高；光谱法灵敏度不高，且干扰较严重电化学分析法具有灵敏度高、分析速度快、操作简便和成本低廉的特性，目前已有多种检测BPA的电化学传感器的研究报道[2-5]，但大都基于对电极的修饰，灵敏度低，重现性较难控制。6.5×10-8 g·L-1。由于化学发光是在瞬间完成且不可控，光谱背景高，检测结果的稳定性和重现性差。电化学发光(ECL) 是将电化学手段和化学发光方法相结合的一种技术, 具备灵敏度高、背景噪音低、时空可控性强、操作简单等优点，弥补了电化学方法的不足。本研究发现，在pH 2的酸性条件下，BPA能够增强钌联吡啶的电致化学发光，且发光强度增强值与BPA的浓度在一定浓度范围内呈线性相关，由此建立了钌联吡啶电致化学发光测定BPA的方法。该法灵敏度高，线性范围宽，仪器简单。 1.1 仪器与试剂 BPLC-K电致化学发光检测仪；CHI1210a电化学分析仪；PHS-3C精密酸度计，三电极系统：玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为对电极，10 mL石英检测池。 取1.0 g BPA溶于5.0 mL纯乙醇中，配成8.8×10-4 mol·L-1 BPA储备液，使用时用二次蒸馏水稀释至所需浓度，置冰箱保存。取7.5 g 六水合三氯钌联吡啶溶于10.0 mL配成1.0×10-3 mol·L-1 液，置于暗处保存，使用时用缓冲溶液稀释。其他试剂均为分析纯，试验用水为二次水。2 试验方法 取1.0×10-3 mol·L-1 Ru(bpy)3溶液 2.5 mL，用pH 2.0的缓冲溶液定容至25.00 mL，后移取2.5 mL于石英检测池中。以玻碳电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，铂电极为对电极，在-2.0～2.0 V扫描范围，0.1 V/s扫速下进行循环伏安扫描并记录电化学及相应的电化学发光图谱。比较加入一定量的双酚A前后电化学及电化学发光图谱的变化，以电化学发光强度的增强值为定量参数进行定量分析。玻碳电极在每次试验前分别用0.3 μm，0.05 μm 的Al2O3进行抛光处理，再用二次水进行清洗后晾干备用。 结果.1 电压施加方法及扫描速率的选择 试验选用了循环伏安法（CV）、常规脉冲扫描(NPV)、微分脉冲扫描(DPV)及线性扫描(LSV)等方法对工作电极施加电压，得到的电化学发光图谱图2。结果表明：采用法施加电压，得到的A的发光峰峰形均较好，且灵敏度高。采用施加电压，得到的发光峰略低于法。所得发光峰较低且变宽。基本观察不到发光峰。因而试验选用施加电压，对A进行电化学发光分析。 图2. 不同扫描方式下A–Ru(bpy)32+体系的电化学发光图谱 Fig 2. ECL spectrum of BPA- Ru(bpy)32+system under different scanner mode 0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液pH=2；Ru(bpy)31.0×10-4 mol·L-1；1.0×10-5 mol·L-1 ；1. CV扫描：扫描电压0～1.6 V，扫描速率0.1 V/s；2. LSV扫描：电压0～1.6 V ，扫描速率0.1 V/S；3. DPV扫描：电压0～1.6 V，脉冲宽度