低氧、无血清培养对人骨髓间充质干细胞增殖、凋亡的影响.pdfVIP

山东医药 2010年第 5O卷第 11期 · 论著 · 低氧、无血清培养对人骨髓间充质 干细胞增殖、凋亡的影响 蒋能刚 ，胥 劲 ，邱 琳 ，唐 莉 ，朱鸿明 。李秀群 ，陈晓禾 ’ (1四川大学华西医院，成都610041；2华两医院生物治疗国家重点 实验 室干细胞与组织工程研 究室) 摘要：目的 观察人骨髓问充质干细胞 (hBM—MSCs)对低氧环境的适应能力，为其临床应用提供依据。方法 体外培养hBM—MSCs，根据培养条件分为四组，常氧正常血清组培养条件为20％0 及 10％FBS／HD、常氧无血清组 为20％02及0％FBS／HD，低氧正常血清组为 1．5％O2及 10％FBS／HD，低氧无血清组为 1．5％O2及 0％FBS／HD， 细胞培养 6、12、24、48、72、96h后采用MTT法检测四组增殖状况；流式细胞术检测四组凋亡情况。结果 在 10％ FBS培养下，48h时低氧可显著促进细胞增殖；在整个观察时间内，低氧培养不会促进hBM—MSCs凋亡；同时元血清 培养时细胞增殖受抑。结论 在正常的血清培养条件下，hBM．MSCs对低氧有较好的耐受性，但是无血清培养不利 于hBM—MSCs增殖，hBM—MSCs可作为缺氧相关组织修复的种子细胞。 关键词：骨髓间充质干细胞；低氧；增殖；凋亡 中图分类号：R551．3；R329．28 文献标志码：A 文章编号：1002-266X(2010)11-0001-03 Effectsofhypoxiaandserum deprivationontheproliferationandapoptosisofhuman bonemarrow derivedmesenchymaIstem cells JlANGNeng—gangI，XU：fin，QIULin TANGLi。ZHUHong—ming，LIx沲一qun．CHENXiao—he (1DepartmentofLaboratoryMedicine， ChinaHospitalofSichuanUnive~ity，Chengdu610041，P．R．China) Abstract：0bjeetive Toinvestigatewhetherhumanbonemarrowderivedmesenchymalstemcellscouldresistthehy- poxiaconditioninvitro，SOastoprovidebasisforitsclinicalapplication．Methods hBM—MSCswereculturedinvitroand dividedintofourgroupsaccordingtotheculturecondition，thenormoxia—normalserum groupwasculturedwith20％O2and 10％FBS+DMEM—HG(FBS／HD)，thenormoxia—serulqldeprivationgroupwasculturedwith20％02and0％FBS／HD，the hypoxia—normalserum groupwasculturedwithI．5％O2and1O％FBS／HD，thehypoxia—seurm deprivationrgoupwascul— turedwith 1．5％O2and0％FBS／HD．6 ，12 ，24 ，48，72and96hafterthecult~e，theproliferationofBM—MSCsinthe fourgroupsweremeasuredbyMITI1method；andtheapoptosisofwhichweredetectedusingflow cyt0metry．Results when ． culturedin 10％FBS／HD，hypoxiaenhancedtheprol