中华鳖出血性肠炎病检疫技术规程.docVIP

中华鳖出血性肠炎病检疫技术规程 1　范围 本标准规定了中华鳖出血性肠炎病（the hemorrhage enteritis in Trionyx sinensis）的检疫方法、判定和无公害化处理。 本标准适用于我省中华鳖出血性肠炎病的检疫。 2　规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T18652　致病性嗜水气单胞菌检验方法 SC/T 7103　水生动物产地检疫采样技术规范 SC/T 7014　水生动物检疫实验技术规范 DB43/221　水生动物检疫规程 3 检疫方法 3.1　检疫程序 按DB43/221的规定执行。 3.2　流行病学调查 对疑似中华鳖出血性肠炎病，应进行流行病学调查与诊断。中华鳖出血性肠炎病流行病学调查与诊断参见附录A。 3.3 目检 检查中华鳖群体，发现鳖静伏于食台或岸边，病鳖在濒死前浮于水面，焦躁不安，病（死）鳖体表无穿孔溃疡，部分病（死）鳖底板白色，为疑似中华鳖出血性肠炎病。 3.4　产地检疫采样 按SC/T 7103 的规定执行。 3.5　解剖检查 病鳖脖子轻度充血、不肿大；鼻孔无血水，腮腺严重充血、发炎，甚至糜烂；腹腔积液；胃膨大，粘膜充血、粘液多；肠粘膜严重充血、出血，部分肠腔中有大量血水或凝血块，少部分有大量白色或淡黄色脓液；心脏缺血变白，部分浅红色；肝肿大，呈紫红色，表面红、白相间呈网状，质脆；脾脏暗红、肿大，剪开有出血点和小的凝血块；肾脏出血、浅红。可进一步判定为疑似中华鳖出血性肠炎病 3.6　病原分离鉴定 经检疫为疑似中华鳖出血性肠炎病的病鳖，应进行病原菌的分离鉴定。 3.6.1　实验准备 3.6.1.1　设备和仪器 无菌室、显微镜、冰箱、恒温培养箱、接种环、剪刀、培养皿等。 3.6.1.2　培养基 普通琼脂平板培养基制备方法参见附录B。 3.6.2　病原菌分离 3.6.2.1　实验室检疫采样 按SC/T7014 的规定执行。 3.6.2.2　取样 用干净纱布擦去鳖体表水分后，用75%酒精棉球擦拭，立即用消毒剪剪开背甲，取肝、脾脏等部位样品接种培养基。 3.6.2.3　分离培养 将取了样的接种环划线接种普通琼脂平板培养基。培养基置28℃恒温培养24h。挑选形态结构、颜色相同的单个菌落，在平板上再次划线分离纯化，28℃恒温培养24h。取单个菌落，用于鉴定。 3.6.3　病原菌鉴定 中华鳖出血性肠炎病病原为嗜水气单胞菌。嗜水气单胞菌的鉴定按GB/T18652的规定进行。 4　判定 病鳖有典型的出血性肠炎病症状和病理变化，病原菌鉴定为嗜水气单胞菌，可确诊为中华鳖出血性肠炎病。 5 无害化处理 5.1　不得将患病鳖异地（塘）转移或上市；病死鳖用锅炉焚烧或加盖生石灰后深埋处理。 5.2　养殖水体用百万分之一的漂白粉溶液全池泼洒消毒；运输水体用百万分之十的漂白粉溶液消毒（15～20）min。运输工具和使用过的器具用渔用复合双链季铵盐消毒剂进行消毒（用量和用法按使用说明书的要求）。  附录A （资料性附录） 中华鳖出血性肠炎病流行病学调查与诊断 调查内容 流行病学情况 判断与诊断 养殖方式 生态养殖很少暴发中华鳖出血性肠炎病。 温室养殖越冬后，鳖从温室转到室外养殖，易暴发中华鳖出血性肠炎病。 季节 中华鳖出血性肠炎病的流行季节为（5～8）月，发病高峰期为（6～7）月。 春夏之交或初夏，鳖大量死亡，且治愈率低，反复发病，可初步判断为中华鳖出血性肠炎病。 水温 养殖池塘水温急剧变化，易暴发中华鳖出血性肠炎病。 池塘水温急剧变化，鳖出现大量死亡，并伴有鲫鱼、鲤鱼死亡，可初步判断为中华鳖出血性肠炎病。 水质 池塘水质好，经常消毒，很少暴发中华鳖出血性肠炎病。 池塘水质差，长时间不0对养殖水体消毒，发生中华鳖出血性肠炎病的可能性较大。 患病鳖规格 中华鳖出血性肠炎病在亲鳖池、成鳖池、幼鳖池都有发生，主要是100克以上的幼鳖、成鳖和亲鳖发病。 多见于100克以下的鳖发病死亡，可初步排除中华鳖出血性肠炎病。 投喂的饵料 喂食鲜鱼等动物性饵料一般不发病，喂食营养不全的配合饲料易发病。 全程喂食营养不全的配合饲料易暴发中华鳖出血性肠炎病。 疫区划分 根据水产养殖病害监测结果，确定产地是否疫区。 如果产地是中华鳖出血性肠炎病疫区，患病鳖出现典型症状，患中华鳖出血性肠炎病的可能性大；如果是非疫区, 患中华鳖出血性肠炎病的可能性相对要小。  附录B （资料性附录） 普通琼脂平板培养基的制备方法 B1　普通琼脂平板 牛肉膏　　　 　 3.0g 蛋白胨　　　 10.0g 磷酸二氢钾（KH2PO4）1.0g