胶质瘤干细胞模型的建立及对替莫唑胺敏感性的研究论文.pdfVIP

·74· 我们的15例p8PD患者均是在MGMT蛋白免疫组织化学检测结果提示下，后续个体化化疗。治疗 后多数病例达到客观有效(66．6％)，所有病例都得到疾病控制。本组病例的中位哪与B砌de8等研 究数据较为接近。既往的研究亦提示，化疗疗效与耐药基因MGMT基因启动子甲基化、MGMT蛋白低 p8PD患者大多是MGMT阴性肿瘤，而且对化疗大多有效。然而，这三者之间是否有直接的联系尚不能 肯定。但化疗药物对肿瘤的杀伤作用强(临床结果为化疗有效)，导致局部继发改变严重(脑水肿和血 管通透性增加)，临床表现为psPD应该是明确的。 总之，psPD是脑胶质瘤综合治疗过程中并不罕见的影像学现象。特别是接受同期放／化疗的患 者。所以，我们在遇到疑似p8PD的患者时，对化疗方案是否更换要慎重，而是否手术干预，更要综合考 虑，多在有明显临床症状者才考虑手术。而密切的动态观察是最重要的鉴别p8PD的方式。当然PET、 MRs、pMRI亦利于协助鉴别，但需要深入探讨。 参考文献(略) 胶质瘤干细胞模型的建立及对替莫唑胺 敏感性的研究 赛克 Shuzhen WKA№d W卸gsonyaPop硪 Yung HowardColm锄陈忠平 多形性胶质母细胞瘤(GlioblastomaMultif0瑚e，GBM)是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤。目前， 疗。但由于GBM对常规放、化疗高度抵抗，仅有不到30％的患者生存期超过2年。胶质瘤干细胞 stem (gliomaceU，GsC)是脑肿瘤中一小群能在体外自我更新及在动物模型中形成肿瘤的细胞。由于 GSc在基因型及表型上与患者肿瘤极为相似，是目前研究GBM发生及进展的理想模型。本文旨在报 道GSc模型的建立及检测GSC对TMz的敏感性，并探讨GSc抗拒化疗药物TMz的可能原因。 资料与方法 (epide帅aJgmwth gr0帆hfactor， bovine FGF，Invitrogen)，胎牛血清(fetal blocking isotypeantibody，Milteny)、兔抗人PrrEN抗体(ceU 轭的IgG2b同型抗体(IgG2b—APc sign础ng)、小鼠 Aldrich)。 作者单位：510060华南肿瘤学国家重点实验室；中山大学肿瘤医院神经外科／神经肿瘤科(赛克、陈忠平)；MD安德森癌症中心 神经肿瘤科(赛克、Shuzlkn w“g、so“yaPopoff、wKAl捌YuIIg、HwardcolⅢ) ·75· 2．GSCs的分离与培养：新鲜手术标本于切除后1至4小时内送至实验室，PBs反复冲洗，去除坏死 组织。将肿瘤组织剪切为约0．5mm组织块，胰酶消化5分钟。使用巴斯德吸管将消化后组织吹打成单 验时，则将GSC8置于含有10％胎牛血清的DMEM培养基中培养。 球行冰冻切片。为行CSC分化后的GFAP染色，将GSC单细胞培养于预置有多聚赖氨酸包被盖玻片的 染色。每步间均用PBS冲洗三次。荧光显微镜下观察。 叶，每组5只。待试验动物出现症状或死亡后取脑，固定于4％多聚甲醛，并行石蜡包埋。石蜡块切片 后，行HE染色。 连续培养72 min，酶标仪490 h后，每孔加入20出的M髑试剂，并于37℃、5％cO：培养箱内孵育90 2．0软件(Biosoft)计算IC50。 nm测量吸光值(A值)。细胞活性=A用药组／A对照缉。calcuSyn 制成单细胞悬液，1000rpⅡ∥min离心5分钟，PBS冲洗细胞并再次离心。80 pl溶剂(pH值