医学分子生物学绪论 　课件.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 1.对人的生理功能和疾病机制的研究, 已由整体水平、器官水平进入到细胞和分子水平；对生命的了解，由表面现象观察进入了本质的探讨。 * * 2.基础医学中不断出现新的边缘学科，如分子生理学、分子药理学、分子病理学、分子遗传学、分子免疫学、分子病毒学、分子肿瘤学、分子神经生物学等等。 * * 3.传统上按“形态”和“机能”来进行基础医学各个学科划分的界限已日益模糊,出现了各学科在分子水平上进行整合的趋势。 * * 4.开始改变传统生物学的研究方法和策略，形成了直接从基因水平入手, 研究基因型和表型的相互关系。 * * （二）分子生物学在病理学中的应用 由于分子生物学向病理学的渗透,出现“分子病理学”这样一个新学科。 分子生物学理论和技术彻底改变了病理学和实验医学的面貌,开始从基因水平来进行疾病诊断。应用于分子病理学的基因检测技术，揭示了疾病发生的分子事件。 * * （三）基因诊断 由于重组DNA技术的问世,人们对于许多疾病的认识,已经深入到基因水平。一种从基因水平对疾病进行诊断的新技术──基因诊断技术得以诞生和发展。 基因诊断：在DNA水平或RNA水平,应用核酸分子杂交技术、限制性内切酶长度多态性（RFLP）连锁分析、PCR技术、DNA序列分析技术以及近年发展起来的DNA芯片技术等,对人类疾病进行诊断。 * * ★基因诊断技术——核酸分子杂交： Southern 印迹杂交技术：1975年，Southern EM发明。 从生物体的细胞中提取基因组DNA，并从中鉴别出某一特异的核苷酸序列。 Northern印迹杂交技术：1977年Alwine JC等发明。 用于样品中某种mRNA分子的定量，分子量大小的测定。 原理：RNA分子在变性琼脂糖凝胶中电泳，按分子量大小不同而相互分离，其原理与Southern转移技术的方法类似。 细胞原位杂交技术：1969年，Pardue等建立。 * * ★基因诊断技术——聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction, PCR) ： 1985年，Mullis K首创。 体外模拟细胞内DNA复制过程，进行体外基因扩增。 * * ★基因诊断技术——基因芯片（Gene chips）技术： 基因芯片技术: 将大量探针固定于支持物上，与标记的样品进行杂交。可一次性对样品中大量序列进行检测和分析。 解决了传统核酸杂交技术操作繁杂、检测效率低的问题。 通过设计不同的探针阵列和使用特定的分析方法，使该技术具有多种不同的应用价值。 如基因表达谱分析、基因突变检测、多态性分析、基因诊断等。 * * 叠加图：绿色代表下调；红色代表上调 ；黄色无差异。 正常样品 Cy3标记 待测样品 Cy5标记 叠加 石奕武，胡维新等：多发性骨髓瘤的基因表达谱分析， 湖南医科大学学报，2003，28（3）：201－205 * * * * * * ★基因诊断的其它技术： DNA序列分析技术（DNA sequencing）； 限制性内切酶长度多态性（RFLP）； PCR-SSCP等。 * * 在法医学中利用DNA指纹图谱技术进行刑事侦破和亲子鉴定。 临床上对遗传病、传染病及常见疾病（如肿瘤、心血管疾病等）的诊断。 基因分型。 基因诊断是通过直接检测目的基因（或该基因的转录产物）的存在状态对疾病作出诊断的方法。 基因诊断的用途 * * 基因诊断技术不仅用于出生后人群的疾病诊断,而且还应用于产前基因诊断和着床前诊断，这样可大大减少有先天性疾病或携带遗传性疾病基因的胎儿出世，促进优生优育，提高人口素质。 产前基因诊断和着床前诊断 * * 基因诊断技术也为流行病学调查以及食品卫生检验和环境卫生监测等工作开创了崭新的领域, 使诊断技术进入一个新的、更高的水平,从而刷新了医学诊断的面貌。 * * (四)基因治疗(gene therapy) 基因治疗是分子生物学理论与技术的飞速发展给医学带来新的希望和新的治疗手段，开辟了治疗学(therapeutics)的新纪元。基因治疗是临床医学中发展起来的新领域，发展十分迅速。 * * 基因治疗技术的